[Validé par KO] Anticorps monoclonal de lapin anti-Hexokinase-1 (HK1) pour WB, IP, IHC-P, ELISA - P19367

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Hexokinase-1

• L'Hexokinase-1 (HK1, également connue sous le nom d'hexokinase de type cérébral, HK I, HK-A) est une enzyme glycolytique d'environ 102 kDa qui catalyse la phosphorylation des hexoses, principalement le glucose, pour produire du glucose-6-phosphate lors de l'étape initiale de la glycolyse.
• HK1 est essentielle au métabolisme du glucose, phosphorylant le D-glucose, le D-glucosamine, le D-fructose, le D-mannose et le 2-désoxy-D-glucose, mais pas la N-acétyl-D-glucosamine (PubMed:1637300, PubMed:25316723, PubMed:27374331). Références connexes : PMID:1637300 PMID:25316723 PMID:27374331
• Au-delà de son rôle métabolique, HK1 agit comme un récepteur de reconnaissance de motifs pour le peptidoglycane bactérien ; la N-acétyl-D-glucosamine cytosolique du peptidoglycane inhibe son activité hexokinase et déclenche sa dissociation de la membrane externe mitochondriale, conduisant à l'activation de l'inflammasome NLRP3 et aux réponses immunitaires innées (PubMed:27374331). Références connexes : PMID:27374331
• La localisation de HK1 est prédominante sur la membrane externe mitochondriale, avec une plus petite fraction dans le cytosol. Cet ancrage couple la glycolyse à la production d'ATP mitochondriale et influence la signalisation métabolique.
• Plusieurs isoformes de HK1 existent par épissage alternatif : l'isoforme 1 est largement exprimée, l'isoforme 2 est spécifique aux érythrocytes, et les isoformes 3 et 4 sont spécifiques aux testicules (PubMed:10978502). Références connexes : PMID:10978502
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler son activité et sa localisation subcellulaire. HK1 est également une enzyme allosthérique et une kinase liant l'ATP.
• Les mutations de HK1 sont associées à des maladies telles que la maladie de Charcot-Marie-Tooth, l'anémie hémolytique héréditaire, le handicap intellectuel et la rétinite pigmentaire, soulignant son importance physiologique critique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 50 à 150 de l'Hexokinase-1 humaine, une région qui peut être conservée entre les espèces. Les utilisateurs travaillant avec des échantillons de souris ou de rat doivent vérifier la réactivité croisée dans leur système modèle.
• Pour le transfert Western (Western blot), une bande proche de 102 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser des conditions réductrices et des contrôles de charge appropriés pour les protéines mitochondriales.
• Dans les applications d'immunoprécipitation et d'immunofluorescence, gardez à l'esprit que HK1 est principalement localisée sur la membrane externe mitochondriale ; la perméabilisation et l'enrichissement des organites peuvent améliorer la détection.
• Pour l'immunohistochimie (IHC), les conditions de récupération de l'antigène et les méthodes de fixation doivent être optimisées pour les antigènes mitochondriaux. Titrez l'anticorps sur les types de tissus pertinents.
• L'anticorps convient aux tests ELISA ; lors de la conception de dosages quantitatifs, incluez des standards appropriés et validez la linéarité et la sensibilité dans la matrice d'échantillons spécifique.

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