Anticorps polyclonal anti-EHMT2 validé par KO pour WB, IP, ELISA - Q96KQ7

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EHMT2

• EHMT2, également connu sous le nom de G9a, BAT8 ou KMT1C, est une histone-lysine N-méthyltransférase codée par le gène EHMT2 (ID du gène : 10919) et appartient à la famille des méthyltransférases à domaine SET.
• Elle agit comme une H3K9 mono- et diméthyltransférase euchromatique (H3K9me1/H3K9me2), créant une marque épigénétique répressive lue par les protéines HP1 pour silencer la transcription. Références associées : PMID:11316813 PMID:20084102
• EHMT2 monométhyle également l'histone H3 au niveau de la Lys-56 (H3K56me1) pendant la phase G1, facilitant l'interaction avec PCNA et la réplication de l'ADN. Références associées : PMID:22387026
• Elle méthyle faiblement H3K27 et modifie l'histone H1.4 au niveau de la Lys-26, élargissant ainsi son répertoire de substrats histoniques. Références associées : PMID:11316813 PMID:19144645
• Au-delà des histones, EHMT2 méthyle des substrats non histoniques, notamment p53 (Lys-373), CDYL, WIZ, DNMT1 et HDAC1, et subit une autométhylation. Références associées : PMID:20118233 PMID:18438403
• La protéine est nécessaire à la méthylation de l'ADN indépendamment de son activité histone méthyltransférase.
• EHMT2 se localise dans le noyau et sur les chromosomes, ce qui est cohérent avec son rôle dans la régulation de la chromatine.
• Elle est largement exprimée, avec les niveaux les plus élevés dans le foie fœtal, le thymus, les ganglions lymphatiques, la rate et les leucocytes du sang périphérique.
• Structurellement, EHMT2 contient des répétitions ankyrine, un domaine SET et des motifs à doigt de zinc, la classant comme une méthyltransférase dépendante du S-adénosyl-L-méthionine et liant les métaux.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 877–1176 (région C-terminale) de l'EHMT2 humain ; envisagez de vérifier la réactivité dans votre système modèle spécifique, car les épitopes peuvent être conservés entre les espèces ou les isoformes.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 132 kDa ; utilisez un marqueur de poids moléculaire haute gamme et un pourcentage de gel approprié (par exemple, SDS-PAGE à 8 %) pour une résolution optimale.
• En immunoprécipitation, testez la concentration d'anticorps et les conditions d'incubation (par exemple, 1–2 µg pour 500 µg de lysat) pour optimiser l'efficacité de capture et réduire le bruit de fond.
• Pour l'ELISA, immobilisez l'antigène à 1–10 µg/mL et titrez l'anticorps pour déterminer la dilution de travail optimale ; incluez des témoins négatifs appropriés.
• Le fournisseur rapporte une validation par knockout pour cet anticorps, soutenant sa spécificité pour la détection de l'EHMT2 endogène ; confirmez l'identité de la cible par knockdown par siRNA ou lignées cellulaires knockout si nécessaire.

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