[KO Validé] Anticorps monoclonal lapin PolymAb® anti-CDKN1A/p21 pour WB, IF/ICC, ELISA - P38936 / P39689

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDKN1A/p21

• CDKN1A/p21, également connu sous les noms de CIP1, WAF1, SDI1, MDA-6 et CAP20, est un inhibiteur de kinase dépendante des cyclines qui joue un rôle central dans la régulation du cycle cellulaire, la sénescence et les réponses aux dommages à l'ADN.
• Il se lie aux complexes cycline-kinase dépendante des cyclines (CDK) et les inhibe, empêchant la phosphorylation de substrats critiques tels que RB1, bloquant ainsi la progression du cycle cellulaire aux points de contrôle G1/S et G2/M.
• Joue un rôle important dans le contrôle de la progression du cycle cellulaire et l'arrêt en G2 induit par les dommages à l'ADN, agissant en aval de p53/TP53 et également dans des voies indépendantes de p53 médiées par CREB3L1 (par similitude).
  Références associées :
  PMID:9106657
• Au niveau des fourches de réplication, p21 entre en compétition avec POLD3 pour la liaison à PCNA, inhibant directement la synthèse d'ADN par l'ADN polymérase delta et contribuant aux réponses au stress de réplication.
  Références associées :
  PMID:11595739
• Présente des fonctions duales : à faible stoechiométrie, il favorise l'assemblage nucléaire et l'activité kinase des complexes cycline D-CDK4, tandis qu'à des rapports plus élevés, il inhibe le même complexe (par similitude).
• La localisation sous-cellulaire s'étend à la fois au noyau, où il exerce ses fonctions canoniques d'inhibition des CDK et de régulation transcriptionnelle, et au cytoplasme, où il peut influencer l'apoptose et la motilité.
• Exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus adultes, avec des niveaux notablement plus faibles dans le cerveau, ce qui est cohérent avec son rôle large dans le contrôle de la prolifération.
• Les modifications post-traductionnelles, y compris la phosphorylation et l'acétylation, modulent sa stabilité, sa localisation et ses interactions ; il contient également un domaine à doigt de zinc, soulignant sa nature multifonctionnelle.

Guide expérimental et conseils techniques

• En tant qu'anticorps monoclonal recombinant de lapin (PolymAb®), il offre une grande cohérence et spécificité d'un lot à l'autre, adapté au WB, IF/ICC et ELISA.
• Pour le Western blot, valider en utilisant des lysats de cellules avec des niveaux élevés de p21 (par exemple, cultures traitées par des agents endommageant l'ADN ou privées de sérum) ; les cellules knockout sont des contrôles négatifs idéaux pour confirmer la spécificité.
• En immunocytochimie/immunofluorescence, optimiser la fixation et la perméabilisation ; s'attendre à une coloration nucléaire et cytoplasmique, et envisager une co-coloration avec des marqueurs de prolifération.
• Pour l'ELISA, tester l'appariement avec un anticorps de capture ou une détection directe, en s'assurant de la compatibilité avec l'immunogène recombinant.
• La réactivité à la fois avec l'humain et la souris rend cet anticorps polyvalent pour les études translationnelles ; toujours effectuer un titrage dans votre propre système expérimental.

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