[KO Validé] Anticorps monoclonal de lapin anti-CDKN1A/p21 pour WB, IHC-P, ELISA - P38936

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDKN1A/p21

• CDKN1A/p21, également appelé CIP1, WAF1, SDI1, MDA-6 et CAP20, est un inhibiteur clé des kinases dépendantes des cyclines impliqué dans la régulation du cycle cellulaire.
• Il joue un rôle essentiel dans le contrôle de la progression du cycle cellulaire et de l'arrêt G2 induit par les dommages à l'ADN, médiant l'inhibition de la prolifération dépendante et indépendante de p53/TP53 (via CREB3L1). Références associées : PMID:9106657
• CDKN1A se lie et inhibe l'activité des kinases dépendantes des cyclines, empêchant la phosphorylation de substrats essentiels pour bloquer la progression du cycle cellulaire. Il module également l'assemblage du complexe cycline D-CDK4 et l'activité kinase de manière dose-dépendante.
• La protéine inhibe la synthèse de l'ADN en entrant en compétition avec POLD3 pour la liaison à PCNA, perturbant la fonction de l'ADN polymérase delta. Références associées : PMID:11595739
• Dans les kératinocytes, il régule négativement la phosphorylation de RB1 induite par CDK4/6, conduisant à la libération de E2F1 et à la transcription des gènes de la phase G1/S.
• Localisée à la fois dans le noyau et le cytoplasme, CDKN1A est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus adultes, avec des niveaux notamment plus faibles dans le cerveau.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination, et elle possède un domaine à doigt de zinc pour la liaison aux métaux.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène couvre la région N-terminale (aa 1-164), qui contient les domaines de liaison à la CDK et à PCNA, ce qui fait de cet anticorps un candidat pour la détection d'interactions fonctionnelles.
• Pour le WB, notez que p21 migre autour de 18-21 kDa ; des contrôles de chargement comme GAPDH ou l'β-actine sont recommandés.
• Validez la réactivité dans les échantillons de souris et de rat, car la réactivité croisée est rapportée ; confirmez la spécificité de la bande dans l'espèce d'intérêt.
• Pour l'IHC-P, optimisez la récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps ; une coloration nucléaire et cytoplasmique peut être observée.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une titration de l'anticorps et de l'antigène pour obtenir un rapport signal sur bruit optimal.

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