[Validé KO] Anticorps polyclonal de lapin anti-CD133 pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - O43490

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Prominine-1

• La Prominine-1 (également appelée AC133, CD133) est une glycoprotéine transmembranaire codée par le gène PROM1 ; l'épissage alternatif génère de multiples isoformes avec des distributions tissulaires distinctes.
• Elle est impliquée dans la différenciation cellulaire, la prolifération et l'apoptose. Références associées : PMID:24556617
• La protéine se lie au cholestérol dans les microdomaines de la membrane plasmique et contribue à l'organisation de la membrane apicale dans les cellules épithéliales.
• Au cours du développement rétinien précoce, la prominine-1 agit comme un régulateur clé de la morphogenèse des disques, soulignant son importance dans la structure des photorécepteurs.
• Dans les cellules de neuroblastome, elle supprime la différenciation neuronale (croissance des neurites) d'une manière dépendante de RET. Références associées : PMID:20818439
• La localisation sous-cellulaire inclut la membrane cellulaire apicale, les microvillosités, les cils, les segments externes des photorécepteurs et le compartiment intermédiaire entre le réticulum endoplasmique et l'appareil de Golgi.
• L'isoforme 1 est un marqueur bien établi des cellules souches et progénitrices hématopoïétiques CD34+, tandis que l'isoforme 2 présente une expression majoritaire dans le foie fœtal, le muscle squelettique, le rein, le cœur et le pancréas adulte, le rein, le foie, le poumon et le placenta.
• Des modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation, la phosphorylation et la glycosylation ont été identifiées, qui peuvent influencer sa fonction et son poids moléculaire dans les essais.
• Des mutations du gène PROM1 sont associées à des dystrophies rétiniennes héréditaires, notamment la dystrophie cône-bâtonnet, la rétinite pigmentaire et la maladie de Stargardt.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 179–433) cible le domaine extracellulaire, ce qui est probablement avantageux pour le marquage de surface en IF/ICC ; assurez des conditions de fixation et de perméabilisation optimales pour les études de localisation cellulaire.
• Pour le western blot, notez que la CD133 est fortement glycosylée ; la masse théorique est d'environ 97 kDa, mais la bande observée peut migrer plus haut. Utilisez des conditions réductrices/dénaturantes et validez avec un contrôle positif (par exemple des cellules souches) parallèlement à la stratégie de contrôle négatif validé par KO fournie.
• Lors de l'immunoprécipitation, des tampons de lyse doux qui préservent l'intégrité des protéines membranaires sont recommandés, et la concentration de l'anticorps doit être optimisée pour chaque système expérimental.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être évalué comme réactif de capture ou de détection ; envisagez de l'associer à un anticorps de détection adapté et de valider avec la protéine CD133 recombinante.
• En tant qu'anticorps polyclonal de lapin, une variabilité d'un lot à l'autre est possible ; il est recommandé de titrer chaque nouveau lot pour l'application prévue et de confirmer la spécificité dans la matrice d'échantillon concernée.

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