[Validé KO] Anticorps polyclonal Anti-ATG5 pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q9H1Y0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATG5

• L'ATG5, également connue sous le nom de protéine d'autophagie 5, APG5-like ou protéine spécifique à l'apoptose, est un composant central de la machinerie d'autophagie. Elle est codée par le gène ATG5 et est largement exprimée dans les tissus humains.
• L'ATG5 est essentielle à la formation des vésicules autophagiques. Elle se conjugue à l'ATG12 via un système semblable à l'ubiquitine impliquant l'ATG7 (de type E1) et l'ATG10 (de type E2), formant le conjugué ATG12-ATG5. Ce conjugué agit comme une enzyme de type E3, facilitant la lipidation des protéines de la famille ATG8 et leur association avec les membranes vésiculaires.
• La protéine joue des rôles critiques dans le contrôle de la qualité mitochondriale, la longévité cellulaire, le développement des lymphocytes, la présentation des antigènes pour le CMH II, le maintien de la morphologie axonale, la différenciation des adipocytes et la ciliogenèse primaire en éliminant l'OFD1 des satellites centriolaires.
• L'ATG5 est localisée dans le cytoplasme et au niveau de la membrane de la structure pré-autophagique, ce qui est cohérent avec sa fonction dans l'autophagie.
• L'ATG5 est impliquée dans l'apoptose, où son expression est un événement relativement tardif en aval de l'activité des caspases. Elle médie la mort cellulaire autophagique induite par l'IFN-gamma en interagissant avec FADD.
• (Infection microbienne) L'ATG5 peut agir comme un facteur proviral. Elle régule négativement la réponse immunitaire antivirale innée en entravant la production d'IFN de type I lors de l'infection par le virus de la stomatite vésiculeuse (VSV) (PubMed:17709747). De plus, elle est nécessaire pour la traduction de l'ARN du virus de l'hépatite C (VHC) entrant et l'initiation de la réplication du VHC (PubMed:19666601). Références connexes : PMID:17709747, PMID:19666601
• La protéine subit une acétylation et fait partie d'un système de conjugaison semblable à l'ubiquitine (liaison isopeptidique). Elle est associée à des mots-clés incluant la structure 3D, l'épissage alternatif, les variants de maladie, l'interaction hôte-virus et la neurodégénérescence.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1-275 de l'ATG5 humaine (NP_004840.1), ce qui représente la protéine pleine longueur. Cette conception permet probablement de capturer la conformation native et peut améliorer la reconnaissance de l'ATG5 endogène.
• L'anticorps est validé pour WB, IF/ICC, IHC-P et ELISA. Pour WB, une bande à environ 32 kDa est attendue. Envisagez d'utiliser des contrôles ATG5 par knockout pour confirmer la spécificité.
• Compte tenu de la forte réactivité croisée avec la souris et le rat, cet anticorps peut être utilisé pour des études sur ces organismes modèles.
• Pour les études sur l'autophagie, l'induction du flux autophagique (par exemple, la privation, les inhibiteurs de mTOR) peut modifier les niveaux de conjugués ATG5 ; l'optimisation des conditions de traitement est recommandée.
• Dans les expériences liées à l'apoptose, notez que l'expression de l'ATG5 augmente en aval de l'activité des caspases ; une analyse chronologique peut être nécessaire pour capturer les changements.
• Pour l'immunoprécipitation et l'IF/ICC, vérifiez la compatibilité de l'anticorps avec votre tampon et vos conditions de fixation, car l'ATG5 peut être associée aux membranes.

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