Anticorps polyclonal de lapin anti-ATG4D validé par KO pour WB et ELISA - Q86TL0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATG4D

• ATG4D (aussi appelé APG4D, AUTL4, autophagine-4 ou HsAPG4D) est un membre de la famille des cystéines protéases ATG4 qui joue un rôle central dans l'autophagie.
• Activation protéolytique : ATG4D clive l'acide aminé C-terminal des protéines de la famille ATG8, notamment MAP1LC3 et GABARAPL2, pour exposer une glycine essentielle à la conjugaison à la phosphatidyléthanolamine (PE) et à l'insertion membranaire ultérieure (PubMed:21177865). Références associées : PMID:21177865
• Activité délipidante : Outre son rôle d'activation, ATG4D catalyse la délipidation des protéines ATG8 conjuguées à la PE lors de la macroautophagie et élimine les conjugués de phosphatidylsérine (PS) dans l'autophagie non canonique (PubMed:29458288, PubMed:33909989). Références associées : PMID:29458288 PMID:33909989
• Spécialisation délipidante : Par rapport à ATG4A, ATG4B et ATG4C, ATG4D est la principale enzyme délipidante pour les protéines de la famille ATG8, avec une activité d'activation protéolytique comparativement faible.
• Rôle dans la mitophagie : ATG4D favorise l'expansion du phagophore pendant la mitophagie en régulant le trafic d'ATG9A vers les mitochondries et en facilitant les contacts entre le réticulum endoplasmique et le phagophore, indépendamment de sa fonction protéase (PubMed:33773106). Références associées : PMID:33773106
• Lien avec l'apoptose : L'import mitochondrial d'ATG4D en conditions de stress cellulaire ou de différenciation relie le dysfonctionnement mitochondrial à l'apoptose, influençant la physiologie mitochondriale, les ROS et la viabilité cellulaire.
• Localisation subcellulaire : ATG4D réside dans le cytoplasme et peut se transloquer dans la matrice mitochondriale.
• Expression tissulaire : Il est largement exprimé dans les testicules et est associé à des processus tels que l'apoptose, l'autophagie et le transport de protéines médié par les thiol protéases.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 1–230 de l'ATG4D humain) couvre le domaine catalytique N-terminal, qui est très conservé chez l'homme, la souris et le rat, ce qui est cohérent avec la réactivité croisée rapportée. Il est recommandé d'utiliser des lysats de contrôle spécifiques de l'espèce pour confirmer la réactivité dans votre essai.
• Pour les applications en Western blot (WB), le poids moléculaire attendu est d'environ 53 kDa. Étant donné que l'expression d'ATG4D peut varier selon le type cellulaire et les conditions de stress, nous recommandons de valider l'anticorps dans votre matrice d'échantillon spécifique.
• L'anticorps a été validé par knock-out (KO) sur certaines lignées cellulaires, ce qui apporte une forte preuve de sa spécificité. Néanmoins, il est conseillé de réaliser votre propre validation avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En ELISA, l'utilisation de l'immunogène recombinant comme antigène de revêtement ou étalon peut aider à optimiser les conditions de l'essai. Réalisez une titration de l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre format de plaque.

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