[Validé par KO] Anticorps polyclonal de lapin anti-ATG4A pour WB, ELISA - Q8WYN0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATG4A

• L'ATG4A est une protéase à cystéine qui joue un rôle clé dans l'autophagie en médiant à la fois l'activation protéolytique et la délipidation des protéines de la famille ATG8. Références associées : PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651
• Elle clive l'acide aminé C-terminal des protéines ATG8 (par exemple, MAP1LC3A, GABARAP, GABARAPL2) pour exposer un résidu glycine, permettant leur conjugaison à la phosphatidyléthanolamine (PE) et leur insertion membranaire. Références associées : PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651
• L'ATG4A fonctionne également comme une enzyme de type désubiquitinante qui retire l'ATG8 des conjugués protéiques (ATG8ylation), contrecarrant les adduits de poids moléculaire élevé. Références associées : PMID:31315929, PMID:33773106
• Elle présente une activité de délipidation sur les protéines ATG8 conjuguées à la PE, une étape de recyclage cruciale lors de la macro-autophagie. Références associées : PMID:29458288, PMID:33909989
• Comparée à son homologue ATG4B, l'ATG4A montre une activité de délipidation plus forte mais une activité de traitement protéolytique plus faible. Références associées : PMID:29458288
• Au-delà de sa fonction de protéase, l'ATG4A favorise la croissance du phagophore lors de la mitophagie en régulant le trafic de l'ATG9A et en médiant les contacts RE-phagophore. Références associées : PMID:33773106
• L'ATG4A se localise principalement dans le cytoplasme.
• Mots-clés : Épissage alternatif, autophagie, hydrolase, protéase, transport des protéines, métabolisme des lipides, voie de conjugaison Ubl.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (aa 289-398) de l'ATG4A humaine, ce qui peut aider à détecter à la fois la forme complète et potentiellement des variants d'épissage dépourvus de portions N-terminales.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est de 45kDa ; assurez-vous d'utiliser un pourcentage de gel approprié et utilisez des lysats de contrôle positif de lignées cellulaires humaines ou murines.
• L'ELISA peut être réalisée en utilisant la protéine recombinante ATG4A ou un revêtement peptidique ; envisagez une titration en damier pour optimiser les concentrations d'anticorps et d'antigène.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité d'un lot à l'autre est possible ; validez chaque nouveau lot dans l'application prévue.
• La validation par knockout indique une spécificité ; incluez le lysat cellulaire KO comme témoin négatif en WB pour confirmer l'identité de la bande.

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