[Validé KO] Anticorps polyclonal de lapin anti-AIF pour WB, IF, IHC, ELISA - O95831

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'AIF

• L'AIF, également appelé protéine 8 de la mort cellulaire programmée (PDCD8), est codé par le gène AIFM1 chez l'homme. Plusieurs isoformes existent grâce à l'épissage alternatif, notamment une isoforme pro-apoptotique et des variants spécifiques du cerveau.
• L'AIF fonctionne comme NADH oxydoréductase dans le métabolisme mitochondrial normal et est un régulateur clé de l'apoptose indépendante des caspases. Après stimulation apoptotique, il est libéré de l'espace intermembranaire mitochondrial vers le cytosol et le noyau, où il déclenche la condensation de la chromatine et une fragmentation à grande échelle de l'ADN (parthanatos). Références associées : PMID:17094969 PMID:20362274 PMID:23217327
• Dans le noyau, l'AIF se lie à l'ADN de manière indépendante de la séquence et induit une fragmentation de l'ADN chromosomique indépendante des caspases, caractéristique du parthanatos. Références associées : PMID:27178839 PMID:20362274
• L'AIF interagit avec EIF3G pour inhiber la synthèse protéique en bloquant la machinerie de traduction EIF3 et active la caspase-7, amplifiant ainsi l'apoptose. Références associées : PMID:17094969
• L'AIF joue un rôle essentiel dans la mort cellulaire pycnotique indépendante des caspases induite par l'exposition au peroxyde d'hydrogène. Références associées : PMID:19418225
• Dans l'homéostasie mitochondriale, l'AIF participe à la biogenèse de la chaîne respiratoire en interagissant avec CHCHD4 et en contrôlant son import mitochondrial. Références associées : PMID:26004228
• Dans des conditions normales, l'AIF est principalement localisé dans l'espace intermembranaire et la membrane interne mitochondriale. Durant l'apoptose, il se transloque vers le cytoplasme, la région périnucléaire et le noyau.
• L'AIF est exprimé dans tous les tissus humains testés à l'exception du cerveau (isoforme 5). Il est détecté dans les muscles, les fibroblastes cutanés et les ostéoblastes. Il est à noter que l'isoforme 5 est fréquemment sous-régulée dans divers cancers humains.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (aa 334-613) de l'AIF humain, ce qui peut permettre la reconnaissance de plusieurs variants d'épissage. Pour des applications comme le Western blot (WB), attendez une bande autour de 67 kDa. Envisagez d'utiliser des lysats validés par knock-out (KO) pour confirmer la spécificité.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), notez que l'AIF est principalement localisé dans les mitochondries des cellules saines, mais se transloque vers le noyau après induction de l'apoptose. Les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour préserver à la fois la coloration mitochondriale et nucléaire.
• En immunohistochimie (IHC-P), la récupération d'antigène peut être nécessaire pour démasquer les épitopes ; testez des protocoles standard à base de citrate ou d'EDTA. Validez sur des tissus contrôles positifs (par exemple, muscle, peau) exprimant l'AIF.
• Pour l'ELISA, la nature polyclonale permet son utilisation à la fois comme anticorps de capture et de détection en format sandwich, mais l'association avec un anticorps monoclonal peut réduire le bruit de fond.

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