Anticorps polyclonal de lapin KMT2A pour WB, IF/ICC, ELISA - Q03164

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de KMT2A

• KMT2A (MLL1, ALL-1, HRX) est la sous-unité catalytique du complexe MLL1/MLL, une histone méthyltransférase qui génère principalement les marques H3K4me1 et H3K4me2 au niveau des régions de chromatine active, facilitant la transcription et la réparation de l'ADN. Références associées : PMID:12453419 PMID:15960975 PMID:19187761
• L'enzyme présente une faible activité méthyltransférase intrinsèque et nécessite l'assemblage avec d'autres membres du complexe central (par ex. WDR5, ASH2L, RBBP5) pour atteindre une pleine capacité catalytique. Références associées : PMID:19187761 PMID:26886794
• Il se lie aux îlots CpG non méthylés dans les promoteurs de gènes cibles, maintenant leur état hypométhylé, et est essentiel pour l'activation transcriptionnelle de HOXA9, un régulateur clé du développement. Références associées : PMID:12453419 PMID:20010842 PMID:20677832
• KMT2A est majoritairement localisée dans le noyau.
• Il est exprimé dans le cœur, les poumons, le cerveau ainsi que les lymphocytes T et B, ce qui correspond à ses rôles dans le développement et l'hématopoïèse.
• Il participe à l'horloge circadienne en médiant la méthylation rythmique de H3K4, qui établit un état de chromatine permissif pour la liaison CLOCK-BMAL1 (par similarité).
• Il subit une autométhylation au niveau de la Cys-3882, une modification qui peut moduler son activité enzymatique. Références associées : PMID:24235145
• KMT2A est un proto-oncogène fréquemment impliqué dans des réarrangements chromosomiques qui produisent des protéines de fusion oncogènes, à l'origine des leucémies aiguës lymphoblastiques et myéloïdes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 2829–2883 proches de l'extrémité C-terminale ; il faut considérer que cet anticorps polyclonal peut reconnaître KMT2A entière (~432 kDa) ainsi que certaines isoformes ou fragments protéolytiques.
• Pour le Western blot, utilisez des gels SDS-PAGE à faible pourcentage (par ex. 6%), des temps de transfert humide prolongés, et ajoutez des inhibiteurs de protéases dans le tampon de lyse pour préserver la grande protéine de 432 kDa.
• En immunofluorescence/immunocytochimie, attendez une coloration nucléaire ; réalisez une co-coloration avec un marqueur nucléaire (par ex. DAPI) et validez la spécificité avec des contrôles par extinction ou knockout.
• Pour l'ELISA, des protocoles standards indirects ou sandwich peuvent être utilisés ; titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre système d'essai spécifique.
• La réactivité croisée avec les orthologues de souris et de rat est rapportée ; cependant, vérifiez l'homologie de séquence et la réactivité dans les lysats de l'espèce étudiée avant de réaliser des expériences à grande échelle.

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