Anticorps polyclonal de lapin KIAA0391/PRORP pour WB et ELISA - O15091

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de KIAA0391/PRORP

• KIAA0391/PRORP, également connu sous le nom de protéine 3 de la ribonucléase P mitochondriale (MRPP3), est la sous-unité catalytique de la RNase P mitochondriale.
• Il fonctionne dans le complexe RNase P avec TRMT10C/MRPP1 et HSD17B10/MRPP2 pour cliver les séquences leader 5' des précurseurs d'ARNt mitochondriaux. Cette activité est strictement dépendante des sous-unités accessoires. Références associées : PMID:18984158, PMID:25953853, PMID:34715011
• Le traitement correct des ARNt par PRORP est essentiel pour la synthèse protéique mitochondriale, et des mutations dans PRORP provoquent le déficit combiné de la phosphorylation oxydative 54 (COXPD54), une maladie mitochondriale primaire.
• La protéine se localise exclusivement dans la matrice mitochondriale, ce qui correspond à son rôle dans la maturation des ARNt mitochondriaux.
• PRORP est une nucléase dépendante des métaux nécessitant du Mg²⁺, du Mn²⁺ ou du Zn²⁺ pour la catalyse, et elle contient un peptide de transit mitochondrial pour l'import.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, et le gène subit un épissage alternatif, suggérant une complexité régulatrice.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (aa 314-583), qui est en aval du peptide de transit mitochondrial prédit, donc l'anticorps reconnaît probablement la forme mature.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de la protéine pleine longueur est d'environ 67 kDa ; cependant, la forme mature traitée peut être plus petite. Validez la taille de la bande détectée en utilisant des lysats mitochondriaux appropriés ou des contrôles recombinants.
• Une réactivité croisée avec le rat a été observée, suggérant que l'anticorps peut reconnaître l'orthologue PRORP dans des échantillons de rat ; vérifiez l'homologie de séquence pour d'autres espèces si nécessaire.
• En ELISA, envisagez d'utiliser une protéine PRORP recombinante ou des extraits mitochondriaux comme antigène de revêtement ; optimisez la concentration de revêtement et la dilution de l'anticorps.
• Étant donné que PRORP est une protéine mitochondriale, une extraction efficace des protéines à partir de fractions mitochondriales peut améliorer la sensibilité de détection en WB.

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