[Validé KD] Anticorps Polyclonal de Lapin TRIM21/SS-A pour WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P19474

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de TRIM21

• TRIM21/SS-A est une ligase E3 d'ubiquitine-protéine possédant des domaines doigt de zinc de type RING, B-box et coiled-coil. Il coopère avec des enzymes E2 (UBE2D1, UBE2D2, UBE2E1, UBE2E2) pour ubiquitiner des substrats incluant USP4, IKBKB et CDKN1B, et forme des complexes de type SCF régulant la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:16297862, PMID:16316627, PMID:16472766, PMID:16880511, PMID:19675099

• Régule négativement l'immunité innée via la dégradation médiée par l'ubiquitine d'IRF3 et la monoubiquitination d'IKBKB pour inhiber la signalisation NF-kB. Il favorise également l'ubiquitination d'IRF8 pour améliorer la transcription des gènes de cytokines. Références associées : PMID:18641315, PMID:19675099

• Médie la dégradation par le protéasome dépendante de l'ubiquitine de la chaîne lourde d'IgG1 via la voie ERAD dépendante de VCP. Références associées : PMID:18022694

• Forme une particule ribonucléoprotéique avec des molécules d'ARN hY ; au moins deux isoformes existent avec des différences spécifiques aux tissus. Références associées : PMID:1985094, PMID:8666824

• Améliore l'activité de décapsage des ARNm de DCP2, établissant un lien avec la régulation post-transcriptionnelle. Références associées : PMID:18361920

• Joue un rôle clé dans l'autophagie en organisant le complexe autophagique (ULK1, BECN1, ATG8) et en régulant la stabilité de FIP200 via l'ubiquitination. Références associées : PMID:26347139, PMID:36359729

• Réponses antivirales : catalyse l'ubiquitination liée à la Lys-27 de MAVS pour renforcer l'immunité innée ; médie l'ubiquitination liée à la Lys-6 d'ISG12a pour promouvoir la pyroptose ; et facilite la formation du complexe NMI-IFI35 via l'ubiquitination liée à la Lys-63. Régule également le désassemblage des granules de stress via l'ubiquitination de G3BP1 suite à un choc thermique. Références associées : PMID:29743353, PMID:36426955, PMID:26342464, PMID:36692217

• Au niveau subcellulaire, TRIM21 se localise dans le cytoplasme, le noyau, les autophagosomes, les corps P et les granules de stress. Les isoformes sont exprimées dans le cœur fœtal et adulte et le poumon fœtal.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Pour le Western blot, une bande d'environ 54 kDa est attendue ; valider l'expression dans les lignées cellulaires humaines, murines ou de rat pertinentes. Penser à charger des contrôles positifs appropriés (par exemple, HEK293, HeLa).
• Immunoprécipitation : Utiliser des conditions de lyse natives pour préserver les interactions protéiques potentielles ; la nature polyclonale peut améliorer la capture des complexes TRIM21.
• Immunofluorescence/ICC et IHC-P : Comme TRIM21 se localise dans plusieurs compartiments (cytoplasme, noyau, granules de stress), optimiser les protocoles de fixation/permeabilisation. Une récupération antigénique peut être nécessaire pour l'IHC-P.
• La réactivité croisée avec le TRIM21 de souris et de rat permet une utilisation translationnelle dans les modèles rongeurs ; vérifier par alignement de séquences et tester dans l'échantillon de l'espèce appropriée.
• ELISA : Cet anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; envisager de le coupler avec un anticorps de détection monoclonal pour le développement d'un ELISA sandwich.
• Comme l'immunogène est un fragment recombinant (aa 86-334), l'anticorps est censé reconnaître les deux isoformes majeures. Confirmer la spécificité d'isoforme dans votre système expérimental.

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