Anticorps polyclonal de lapin anti-TFEB validé par KD pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P19484

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TFEB

• Le facteur de transcription EB est un régulateur maître de la biogenèse lysosomiale, de l'autophagie et des processus métaboliques et immunitaires associés.
  Références associées : PMID:21617040, PMID:22343943, PMID:22576015
• Il se lie aux motifs ADN boîte E et boîte CLEAR après dimérisation avec des membres de la famille MiT/TFE comme TFE3 ou MITF.
  Références associées : PMID:1748288, PMID:19556463, PMID:29146937, PMID:22692423
• La phosphorylation sensible aux nutriments par MTOR contrôle la localisation subcellulaire de TFEB : la phosphorylation le retient dans le cytosol, tandis que la déphosphorylation déclenche son import nucléaire.
  Références associées : PMID:21617040, PMID:22343943, PMID:22576015, PMID:22692423
• TFEB promeut l'expression des gènes liés à l'autophagie, régulant positivement la voie autophagique.
  Références associées : PMID:21617040, PMID:22576015, PMID:23434374
• Lors d'une infection bactérienne, l'itaconate alkyle TFEB, déclenchant sa translocation nucléaire et l'activation des gènes lysosomiaux pour favoriser l'élimination des pathogènes.
  Référence associée : PMID:35662396
• TFEB se localise dans le noyau, le cytoplasme et la membrane du lysosome, ce qui reflète ses rôles multifonctionnels dans l'homéostasie cellulaire.
• Il est soumis à la phosphorylation, à l'épissage alternatif et à l'ubiquitination, et joue un rôle dans l'immunité adaptative.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 50 à 173) couvre la région N-terminale commune aux isoformes de TFEB humain, ce qui permet vraisemblablement d'obtenir des anticorps reconnaissant à la fois la forme pleine longueur et les variants d'épissage potentiels. Pensez à valider les profils de bandes dans les lysats pertinents.
• Pour le WB, le poids moléculaire prédit est de 53 kDa, mais la phosphorylation peut entraîner un léger décalage vers le haut. Utilisez un fractionnement nucléaire/cytoplasmique ou des échantillons de knockout/knockdown de TFEB pour confirmer la spécificité.
• En IF/ICC, TFEB est retenu dans le cytoplasme en conditions riches en nutriments et s'accumule dans le noyau après starvation ou inhibition lysosomiale. Incluez des contrôles appropriés pour vérifier les changements de localisation subcellulaire.
• Pour l'IHC-P, une récupération d'antigène et une amplification du signal peuvent être nécessaires ; testez sur des tissus positifs connus comme le rein ou le foie, où l'expression de TFEB est documentée.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection associé à la protéine TFEB recombinante ; optimisez les concentrations de revêtement et les conditions de blocage.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat permet des études comparatives, mais validez systématiquement dans le contexte biologique de l'espèce étudiée en raison de variations potentielles d'épitope.
• En tant qu'anticorps polyclonal, les performances peuvent varier d'un lot à l'autre ; un contrôle qualité régulier utilisant un étalon de référence est recommandé pour garantir la reproductibilité des résultats.

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