Anticorps monoclonal de lapin anti-RAB27A validé par KD pour WB, IF, IHC, ELISA - P51159

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de RAB27A

• RAB27A est une petite GTPase de la famille Rab qui alterne entre des formes inactives liées au GDP et des formes actives liées au GTP, recrutant des effecteurs pour réguler la formation, le déplacement, l’arrimage et la fusion des vésicules. Références associées : PMID:30771381
• Elle régule l’homéostasie de la voie endocytaire tardive en contrôlant le positionnement, la maturation et la sécrétion des endosomes. Références associées : PMID:30771381
• RAB27A est essentielle à l’exocytose des granules cytotoxiques dans les lymphocytes, où elle est nécessaire à la maturation des granules et à leur arrimage au niveau de la synapse immunologique. Références associées : PMID:18812475
• Au niveau subcellulaire, RAB27A s’associe aux membranes des mélanosomes, des endosomes tardifs et des lysosomes.
• Elle est largement exprimée dans la plupart des tissus, à l’exception du cerveau, avec de faibles niveaux dans le thymus, les reins, les muscles et le placenta ; elle est détectée dans les mélanocytes, les cellules tumorales, les CTL et les mastocytes.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la prénylation (lipoprotéine), la phosphorylation, l’acétylation et la méthylation, qui sont essentielles à sa fonction.
• La protéine existe sous forme d’isoformes issues d’un épissage alternatif et est associée à des variants de maladies humaines (par exemple, le syndrome de Griscelli).
• UniProt indique un poids moléculaire prédit de 24 868 Da, ce qui concorde avec la bande d’environ 25 kDa observée dans les essais.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre la longueur totale de RAB27A (aa 1 à 221), qui est hautement conservée chez l’humain, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• En Western blot, une bande d’environ 25 kDa est attendue ; il est recommandé d’utiliser des contrôles positifs tels que des lymphocytes, des lignées cellulaires de mélanome ou des tissus riches en cellules immunitaires.
• Pour l’immunofluorescence (IF/ICC, IF-P), un marquage membranaire/périnucléaire compatible avec une localisation endosomale/lysosomale est attendu ; valider avec des marqueurs d’organites appropriés.
• Pour les applications ELISA, la protéine recombinante utilisée comme immunogène peut servir de contrôle positif.
• Pour l’IHC-P, tester sur des tissus dont l’expression de RAB27A est connue, tels que la rate ou des tissus tumoraux, et inclure des contrôles spécifiques aux tissus.

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