[Validé KD] Anticorps polyclonal Anti-MAD1/MAD1L1 pour WB, ELISA - Q9Y6D9

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MAD1/MAD1L1

• MAD1L1 (également connu sous le nom de MAD1, TXBP181) code la protéine MAD1 du point de contrôle de l'assemblage du fuseau mitotique, un gardien critique de la fidélité mitotique.
• Il forme un complexe hétérotétramérique avec MAD2L1 fermé (C-MAD2) aux kinétochores non attachés, favorisant la conversion de MAD2L1 ouvert (O-MAD2) en C-MAD2 pour propager le signal « attendre l'anaphase ». Références connexes : PMID:10049595 PMID:20133940 PMID:29162720
• Dans le carcinome hépatocellulaire, MAD1 peut séquestrer MAD2L1 dans le cytoplasme, altérant le point de contrôle de l'assemblage du fuseau et contribuant à l'instabilité chromosomique.
• La protéine se localise dynamiquement aux kinétochores, centrosomes, pôles du fuseau et enveloppe nucléaire pendant la mitose, et transite également par le cytoplasme.
• MAD1 est soumis à des modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation et l'acétylation, qui régulent ses fonctions dépendantes du cycle cellulaire.
• L'expression tissulaire est notable dans les carcinomes hépatocellulaires et les lignées cellulaires d'hépatome, en accord avec sa pertinence oncogénique.
• L'épissage alternatif de MAD1L1 génère plusieurs isoformes, et des mutations sont associées à des défauts du point de contrôle liés au cancer.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 351–718 du MAD1 humain, englobant une grande région C-terminale conservée entre les isoformes ; cet anticorps polyclonal peut donc reconnaître plusieurs variantes.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire attendu est d'environ 83 kDa ; utilisez un gel SDS-PAGE à 10 % et assurez-vous d'un transfert complet pour les protéines de poids moléculaire élevé.
• La réactivité en ELISA doit être validée dans les conditions spécifiques de l'essai ; envisagez des titrations en damier pour déterminer les concentrations optimales d'antigène de revêtement et d'anticorps.
• Comme pour tout réactif polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être confirmée à l'aide d'un lysat cellulaire standardisé ou d'une protéine recombinante.

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