[KD Validé] Anticorps monoclonal de lapin anti-GALC pour WB, IHC-P, ELISA - P54803

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la GALC

• La GALC hydrolyse les liaisons esters galactose des glycolipides, y compris le galactosylcéramide et le galactosylsphingosine, et médie le catabolisme lysosomal du galactosylcéramide, un lipide majeur dans la myéline, les reins et les épithéliums. Références associées : PMID:8281145, PMID:8399327
• La protéine appartient à la famille des glycosyl hydrolases 59 et est hautement conservée entre l'humain, la souris et le rat.
• L'épissage alternatif des transcrits de GALC produit plusieurs isoformes, qui peuvent avoir des rôles régulateurs ou fonctionnels distincts.
• Au niveau subcellulaire, la GALC se localise dans le lysosome, ce qui est cohérent avec son activité d'hydrolase acide.
• La GALC est exprimée dans divers tissus, avec des niveaux détectables dans les testicules, le cerveau, le placenta, l'urine, les reins et le foie.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée et la formation de ponts disulfure, qui sont critiques pour le repliement et la stabilité de l'enzyme.
• Les mutations perte de fonction dans GALC conduisent à la maladie de Krabbe (leucodystrophie à cellules globoïdes), caractérisée par une démyélinisation sévère et une neurodégénérescence.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le Western blot, une dilution de départ de 1:500 à 1:2 000 est souvent adaptée pour détecter la bande de GALC d'environ 77 kDa dans des lysats cellulaires ou tissulaires. Valider dans des échantillons pertinents tels que le cerveau, les testicules ou les reins.
• En immunohistochimie (paraffine), la récupération antigénique utilisant un tampon citrate (pH 6.0) peut améliorer la coloration. Envisager d'utiliser des tissus témoins positifs comme le cerveau ou le placenta.
• Les applications ELISA peuvent utiliser l'anticorps comme réactif de capture ou de détection ; l'appariement optimal et les concentrations doivent être déterminés en utilisant de la GALC recombinante ou des échantillons biologiques calibrés.
• L'anticorps reconnaît la GALC humaine, murine et de rat, ce qui le rend utile pour des études comparatives inter-espèces.
• En tant qu'anticorps monoclonal validé par knockdown, il peut offrir une spécificité fiable pour la cible dans les tests de Western blot ; les utilisateurs doivent confirmer l'efficacité du knockdown dans leur propre système expérimental.
• Stockage et manipulation : aliquoter et conserver à -20°C pour une stabilité à long terme ; éviter les cycles répétés de congélation-décongélation.

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