[Validé par KD] Anticorps polyclonal anti-FGFR3 pour WB, FC, ELISA - P22607

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de FGFR3

• Le récepteur 3 du facteur de croissance des fibroblastes (FGFR3), également désigné CD333, JTK4 et ACH, est un membre de la superfamille des immunoglobulines des récepteurs tyrosine kinase. Plusieurs isoformes sont générées par épissage alternatif, dont une isoforme sécrétée (isoforme 3) qui conserve sa capacité de liaison au ligand.
• FGFR3 est un récepteur de surface cellulaire qui se lie aux facteurs de croissance des fibroblastes, déclenchant des cascades de signalisation intracellulaires qui régulent la prolifération, la différenciation et l'apoptose cellulaires. Il est essentiel pour la différenciation normale des chondrocytes et le développement squelettique, et module également l'ostéogenèse et la minéralisation osseuse postnatale.
• La liaison du ligand active des voies clés : la phosphorylation de PLCG1 produit des seconds messagers ; la phosphorylation de FRS2 recrute GRB2/SOS1 conduisant à l'activation de RAS-MAPK (ERK1/2), et active également la voie de signalisation AKT1. Ces cascades médient divers résultats cellulaires, notamment l'apoptose des chondrocytes et la prolifération des cellules cancéreuses.
• FGFR3 est principalement localisé sur la membrane plasmique, mais on le trouve également dans les vésicules cytoplasmiques et le réticulum endoplasmique. L'isoforme 3 sécrétée peut interférer avec la signalisation FGF en se liant aux ligands extracellulairement.
• L'expression tissulaire inclut le cerveau, les reins, les testicules et les tissus fœtaux comme le poumon, l'intestin grêle et les reins. L'isoforme 2 est détectée dans les cellules épithéliales, tandis que l'isoforme 1 se trouve dans les cellules fibroblastiques.
• La dérégulation de FGFR3, souvent due à des mutations activatrices, est impliquée dans les dysplasies squelettiques (par exemple l'achondroplasie, la dysplasie thanatophorique), la craniosténose et de multiples cancers. FGFR3 constitutivement actif favorise la signalisation de STAT1, STAT5 et PTPN11/SHP2, contribuant à l'oncogenèse.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre la région extracellulaire (acides aminés 23–375), présente dans toutes les isoformes membranaires et sécrétées. Vérifiez la détection des isoformes souhaitées dans votre matrice d'échantillon en consultant la littérature et en utilisant des contrôles spécifiques d'isoforme.
• En Western blot, attendez plusieurs bandes entre 75 et 88 kDa dues à la glycosylation différentielle et à l'expression des isoformes. Optimisez les contrôles de charge et envisagez d'utiliser des enzymes de déglycosylation pour confirmer la spécificité.
• Pour la cytométrie en flux, utilisez des cellules non perméabilisées pour cibler FGFR3 de surface. Incluez un contrôle d'isotype pertinent et validez avec des lignées cellulaires surexprimant FGFR3 ou déplétées par siRNA.
• En ELISA, l'isoforme 3 sécrétée peut entrer en compétition pour les anticorps de capture ou de détection. Clarifiez préalablement les surnageants de culture ou utilisez des paires monoclonales/polyclonales conçues contre des épitopes non chevauchants.

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