Polyclonal Antibodies
[KD Validé] Anticorps polyclonal de lapin anti-eIF4E pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P06730
Numéro d'article : CM0023617
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- Application
- WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA
- Cross Reactivity
- Humain, Souris, Rat
- Protein Weight
- 25kDa
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Spécifications et paramètres clés du produit
| Paramètre | Spécification |
|---|---|
| Nom du produit | [KD Validé] eIF4E Rabbit pAb |
| Remarques / Alias | CBP; EIF4F; AUTS19; EIF4E1; eIF-4E; EIF4EL1; 4E |
| Espèce | Humain |
| GeneID (Humain) | 1977 |
| GeneID | 1977 |
| Immunogène | Peptide synthétique; Un peptide synthétique correspondant à une séquence située dans la région des acides aminés 1-100 de l'eIF4E humain (NP_001959.1). |
| Source | Lapin |
| Catégorie | Anticorps polyclonaux |
| Application | WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA |
| Réactivité croisée | Humain, Souris, Rat |
| SWISS | P06730 |
| Poids de la protéine | 25 kDa |
| Expédition | Sac de glace |
Contexte biologique : Fonction et localisation de l'eIF4E
- eIF4E (codé par EIF4E ; alias EIF4EL1, EIF4F) est une protéine de liaison à la coiffe des ARNm de 25 kDa, et la sous-unité essentielle de reconnaissance de la coiffe du complexe d'initiation de la traduction eIF4F. Il stimule la traduction dépendante de la coiffe en facilitant le recrutement du pré-complexe d'initiation 43S à l'extrémité 5' de l'ARNm. Références associées : PMID:11606200 PMID:22578813 PMID:22684010
- Il se lie spécifiquement à la structure de coiffe 7-méthylguanosine (m7G) des ARNm et favorise le dénouement dépendant de l'ATP des structures secondaires de l'extrémité 5', une étape critique pour la liaison et le défilement du ribosome. Références associées : PMID:16271312 PMID:22578813
- Dans le noyau, l'eIF4E médie l'export des ARNm en formant des complexes avec LRPPRC et XPO1 ; il facilite le transport nucléocytoplasmique de transcrits spécifiques tels que NOS2/iNOS et MDM2, influençant ainsi leur expression cytoplasmique. Références associées : PMID:23471078 PMID:22684010
- Dans les corps P cytoplasmiques, l'eIF4E participe à un complexe qui séquestre les ARNm inactivement traduits, empêchant leur dégradation et permettant leur stockage ou une réactivation traductionnelle ultérieure. Références associées : PMID:24335285
- Avec EIF4G1, l'eIF4E est nécessaire à la traduction dépendante de TISU (Initiateur de traduction des 5'UTR courts), un mécanisme sans défilement qui contourne le besoin du défilement promu par eIF1. Références associées : PMID:29987188
- eIF4E se localise dans plusieurs compartiments sous-cellulaires : le cytoplasme (y compris les corps P et les granules de stress) et le noyau (ponctuations nucléaires, corps nucléaires), une distribution qui reflète ses doubles fonctions dans la traduction et l'export des ARN.
- La protéine est modifiée post-traductionnellement par acétylation et phosphorylation, qui modulent son affinité de liaison à la coiffe et son interaction avec ses partenaires de liaison.
- La dérégulation de l'eIF4E est associée aux troubles du spectre autistique et à la tumorigénèse, souvent via des réarrangements chromosomiques ou une surexpression qui altèrent les programmes de traduction cellulaire.
Conseils expérimentaux et astuces techniques
- L'immunogène se situe dans la région N-terminale (aa 1-100), une zone peu modifiée ; ces anticorps peuvent détecter à la fois l'eIF4E phosphorylé et non phosphorylé, mais les utilisateurs doivent vérifier la spécificité dans leur propre système expérimental.
- Pour le Western blot, attendez une bande majeure à ~25 kDa ; le poids moléculaire rapporté de l'eIF4E est de 25 kDa (théorique ~25,1 kDa), et il peut apparaître sous forme d'une bande simple ou d'un doublet selon l'état de phosphorylation.
- En IHC-P, les conditions de récupération d'antigène (par exemple, tampon citrate pH 6,0) doivent être optimisées ; les contrôles positifs incluent les tissus exprimant fortement l'eIF4E tels que le testicule, les cellules en prolifération ou certaines coupes de tumeurs.
- Pour l'immunoprécipitation, utilisez des billes de protéine A ou G adaptées aux anticorps polyclonaux de lapin ; la réticulation de l'anticorps aux billes peut améliorer la récupération des complexes de faible abondance.
- IF/ICC peut révéler à la fois une coloration cytoplasmique et nucléaire ; incluez des étapes de perméabilisation et de blocage appropriées, et envisagez une co-coloration avec des marqueurs de corps P ou nucléaires pour évaluer les changements de localisation.
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Fiche Technique du Produit
[KD Validé] Anticorps polyclonal de lapin anti-eIF4E pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P06730
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