[KD Validé] Anticorps monoclonal de lapin anti-Aurora B pour WB, IF/ICC, ELISA - Q96GD4

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Aurora kinase B

• L'Aurora kinase B (AURKB, également appelée AIK2, AIM1, STK12) est une sérine/thréonine kinase qui constitue la sous-unité catalytique du complexe passager chromosomique (CPC), essentiel à une ségrégation précise des chromosomes et à la cytodiérèse (PubMed:11516652, PubMed:12925766, PubMed:14610074). Références associées : PMID:11516652 PMID:12925766 PMID:14610074
• Elle régule les étapes clés de la mitose en phosphorylant des substrats tels que BIRC5/survivine, INCENP, les histones H3S10/H3S28 et CENPA, assurant l'activation du point de contrôle de l'assemblage du fuseau et la fixation des kinétochores aux microtubules (PubMed:11784863, PubMed:11856369, PubMed:11756469). Références associées : PMID:11784863 PMID:11856369 PMID:11756469
• L'activité d'AURKB est potentialisée par la phosphorylation d'INCENP via une boucle de rétroaction positive avec HASPIN au niveau des centromères (PubMed:11516652, PubMed:21658950). Références associées : PMID:11516652 PMID:21658950
• La kinase est un composant essentiel du point de contrôle de la cytodiérèse : elle phosphoryle CHMP4C pour retarder l'abscission et empêcher la formation de ponts chromosomiques (PubMed:22422861, PubMed:24814515). Références associées : PMID:22422861 PMID:24814515
• Pendant la mitose, AURKB se localise dynamiquement dans le noyau, aux centromères, aux kinétochores, aux microtubules du fuseau et au corps médian, ce qui reflète ses multiples rôles dans la dynamique chromosomique et la division cellulaire.
• Elle est fortement exprimée dans le thymus, la rate, le poumon, le testicule, le côlon, le placenta et le foie fœtal, son expression atteint un pic pendant les phases S et G2/M ; elle est souvent surexprimée dans les cancers, avec des niveaux plus élevés dans les métastases hépatiques par rapport au foie normal.
• AURKB phosphoryle l'histone H3 au niveau des Ser10 et Ser28, une caractéristique de la mitose et un marqueur couramment utilisé pour les études du cycle cellulaire (PubMed:11784863, PubMed:11856369). Références associées : PMID:11784863 PMID:11856369
• Parmi les autres substrats figurent KIF2C, RACGAP1, VIM et p53/TP53, ce qui relie AURKB à divers processus mitotiques et au contrôle des points de contrôle (PubMed:20959462). Références associées : PMID:20959462

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé est un peptide N-terminal (acides aminés 1–100) de l'Aurora B humain ; pour le Western blot, des conditions dénaturantes peuvent améliorer l'exposition de l'épitope. Les bandes non spécifiques peuvent être réduites en optimisant le blocage et la dilution de l'anticorps.
• En IF/ICC, Aurora B présente une localisation dynamique pendant la mitose ; les protocoles de fixation et de perméabilisation doivent être validés pour préserver l'antigénicité et l'accès aux centromères / corps médian.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser l'anticorps pour la capture ou la détection après avoir confirmé sa liaison à l'Aurora B recombinante ou native, avec une titration appropriée et des puits de contrôle.
• La validation KD (knockdown) indique la spécificité ; cependant, confirmez la réactivité dans votre système d'échantillons à l'aide de contrôles négatifs appropriés (par exemple, knock-out).
• L'anticorps présentant une réactivité croisée avec la souris et le rat, il peut être utilisé sur des lignées cellulaires et des tissus de rongeurs, bien qu'une validation spécifique à l'espèce soit recommandée.

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