AcM de lapin spécifique de la liaison K48 de l'Ubiquitine - P0CG47

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Ubiquitine

• Codée par le gène UBB, la polyubiquitine-B est une protéine précurseur clivée pour générer de multiples monomères d'ubiquitine.
• L'ubiquitine existe soit libre, soit attachée de manière covalente à des protéines cibles via une liaison isopeptidique, servant de modificateur post-traductionnel polyvalent.
• Les chaînes de polyubiquitine peuvent être formées via différentes liaisons lysine (par ex. K6, K11, K29, K33, K48, K63) ou des liaisons linéaires, chacune dictant des devenirs cellulaires distincts.
• Les chaînes de polyubiquitine liées en K48 ciblent principalement les protéines pour leur dégradation par le protéasome 26S, une voie critique pour le contrôle qualité des protéines et la régulation du cycle cellulaire.
• Les chaînes liées en K63 sont impliquées dans des processus non protéolytiques tels que l'endocytose, les réponses aux dommages à l'ADN et l'activation du facteur de transcription NF-kappa-B.
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le noyau et la membrane externe mitochondriale, reflétant ses rôles fonctionnels diversifiés.
• L'ubiquitine elle-même est sujette à des modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation et l'ADP-ribosylation, qui peuvent moduler son activité et ses interactions.
• Les chaînes de polyubiquitine libres (non ancrées) participent également à la signalisation cellulaire, comme l'activation de protéines kinases, indépendamment de leur conjugaison à d'autres protéines.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique conçu pour reconnaître spécifiquement la topologie de la polyubiquitine liée en K48 ; envisagez d'utiliser des contrôles spécifiques de la liaison pour confirmer la spécificité de l'anticorps.
• Pour le Western blot (WB), une préparation d'échantillon dans des conditions dénaturantes et réductrices est recommandée pour détecter les conjugués d'ubiquitine ; validez les performances dans votre système d'échantillon spécifique.
• En immunofluorescence (IF/ICC), les protocoles de fixation et de perméabilisation doivent être optimisés pour préserver les signaux d'ubiquitine ; incluez des contrôles négatifs pour évaluer le bruit de fond.
• Pour les applications ELISA, les antigènes de revêtement doivent être soigneusement sélectionnés pour mimer l'épitope de liaison K48 ; confirmez les limites de détection avec des étalons connus.
• La réactivité croisée est rapportée uniquement pour les échantillons humains ; si vous travaillez avec d'autres espèces, vérifiez l'homologie de séquence et effectuez une validation supplémentaire.

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