Ac pAb lapin IFNAR2 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P48551

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IFNAR2

• L'IFNAR2 (récepteur de l'interféron alpha/bêta 2), également connu sous le nom d'IFNABR, IFNARB ou IFN-alpha-REC, code pour la chaîne bêta du récepteur de l'interféron de type I. Plusieurs isoformes sont générées par épissage alternatif ; notamment, l'isoforme 3 est une forme sécrétée détectée dans l'urine (PubMed:7759950, PubMed:8181059). Le récepteur est exprimé dans les cellules sanguines, les lignées cellulaires lymphoblastoïdes et les fibrosarcomes. Références associées : PMID:7759950 PMID:8181059
• Conjointement avec l'IFNAR1, l'IFNAR2 forme le récepteur hétérodimérique fonctionnel des interférons de type I (IFN-α, -β, -ε, -ω, -κ) (PubMed:10049744, PubMed:10556041, PubMed:21854986). La liaison du ligand rapproche les sous-unités, déclenchant l'activation des kinases Janus associées. Références associées : PMID:10049744 PMID:10556041 PMID:21854986
• L'activation du récepteur entraîne la trans-phosphorylation de JAK1 (lié à l'IFNAR2) et TYK2 (lié à l'IFNAR1) (PubMed:10556041, PubMed:11682488, PubMed:12105218). Par la suite, des résidus de tyrosine spécifiques sur les domaines intracellulaires de l'IFNAR1/2 deviennent phosphorylés, créant des sites d'ancrage pour STAT1 et STAT2 (PubMed:11682488, PubMed:12105218, PubMed:21854986). Références associées : PMID:10556041 PMID:11682488 PMID:12105218 PMID:21854986
• Les protéines STAT phosphorylées se transloquent vers le noyau pour moduler la transcription de centaines de gènes stimulés par l'interféron (ISG), orchestrant les réponses antivirales, antiprolifératives et immunomodulatrices (PubMed:12105218, PubMed:28165510, PubMed:9121453). Références associées : PMID:12105218 PMID:28165510 PMID:9121453
• Outre son rôle dans la transduction du signal, l'IFNAR2 peut également agir comme un puissant inhibiteur de l'activité du récepteur de l'interféron de type I, probablement par une liaison compétitive au ligand ou la régulation de la stabilité du récepteur.
• La protéine traverse la membrane cellulaire et contient des domaines de type fibronectine III extracellulaires ; elle subit une glycosylation et la formation de ponts disulfures, comme le montrent les analyses protéomiques, et est soumise à une phosphorylation régulatrice.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 27-243), ainsi l'anticorps est censé cibler la région de liaison du ligand ; convient aux études de blocage du récepteur ou à la détection de récepteurs solubles dans les fluides biologiques.
• Pour le Western blot, une bande à environ 58 kDa est prédite ; cependant, en raison de la glycosylation N-liée et d'un éventuel traitement protéolytique, des bandes supplémentaires ou un poids moléculaire apparent plus élevé peuvent être observés. Validez avec des témoins positifs (par exemple, cellules traitées à l'IFN) et négatifs.
• En immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF/ICC), un marquage membranaire est attendu. Pour les tissus ou cellules exprimant l'isoforme sécrétée, un signal cytoplasmique ou de la matrice extracellulaire peut être détecté ; des protocoles appropriés de fixation et de perméabilisation doivent être testés.
• Pour l'ELISA, cet anticorps polyclonal peut être utilisé comme réactif de détection lorsqu'il est associé à un anticorps monoclonal de capture approprié ; la réactivité croisée avec l'IFNAR2 de souris et de rat doit être vérifiée dans la matrice de l'essai.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être surveillée, et des expériences de titration sont recommandées pour de nouvelles applications.

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