Anticorps monoclonal de lapin anti-IgE humaine pour WB, FC, ELISA - P01854

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IgE

• L'IgE est une région constante epsilon de la chaîne lourde des immunoglobulines qui définit l'isotype IgE. C'est une glycoprotéine avec des ponts disulfure intra- et inter-chaînes.
• La spécificité de liaison à l'antigène de l'IgE est déterminée par les domaines variables générés par la recombination V(D)J et l'hypermutation somatique, permettant une reconnaissance de haute affinité. Références associées : PMID:17576170, PMID:20176268
• L'IgE sécrétée médie les réponses allergiques et anti-parasitaires en se liant au récepteur de haute affinité FCER1A sur les mastocytes, les basophiles et les éosinophiles, déclenchant la dégranulation et la libération d'histamine, de leucotriènes et de cytokines. Références associées : PMID:25629393, PMID:33840121, PMID:8114916, PMID:8551243
• L'IgE interagit également avec le récepteur de faible affinité FCER2 sur les macrophages pour stimuler l'élimination des parasites et sur les lymphocytes B pour améliorer la présentation de l'antigène. Références associées : PMID:7544003, PMID:2167225
• L'IgE liée à la membrane existe sous forme d'isoformes longues et courtes, formant le complexe du récepteur des lymphocytes B (BCR). Le pontage de l'antigène avec le BCR contrôle la survie et la différenciation des lymphocytes B IgE+.
• L'expression de l'IgE se trouve principalement dans les lymphocytes B après stimulation avec l'IL-4 et le CD40, la reliant aux réponses immunitaires de type Th2.
• L'épissage alternatif du gène IGHE génère des isoformes sécrétées et deux isoformes liées à la membrane, chacune ayant des propriétés de signalisation distinctes.
• Les réponses IgE dérégulées contribuent aux conditions allergiques et anaphylactiques. Références associées : PMID:25629393, PMID:33840121, PMID:7544003

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 104-428 de la région constante de l'IgE humaine, couvrant les domaines CH2-CH4. Cette conception assure la reconnaissance de la région Fc partagée par les isoformes sécrétées et liées à la membrane.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des conditions réductrices ; le poids moléculaire observé peut être d'environ 47 kDa comme indiqué, mais la glycosylation peut déplacer la bande ou produire un smear.
• En cytométrie en flux (FC), cet anticorps est adapté pour détecter l'IgE liée à la membrane sur les lymphocytes B ou l'IgE capturée par les récepteurs Fc sur les basophiles/mastocytes ; des contrôles d'isotype appropriés et des étapes de blocage du Fc sont recommandés.
• Pour les applications ELISA, cet anticorps monoclonal peut servir de réactif de capture ou de détection pour la quantification de l'IgE totale ; optimisez la concentration de revêtement et associez-le à un anticorps de détection anti-IgE polyclonal ou monoclonal approprié.
• Étant donné que les concentrations d'IgE dans le sérum/plasma sont faibles, la préparation des échantillons et la sensibilité du test doivent être vérifiées avec des courbes standard utilisant une protéine IgE purifiée.

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