HDAC8 Lapin mAb pour IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9BY41

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HDAC8

• L'histone désacétylase 8 (HDAC8), également connue sous le nom de HDACL1, est un membre de la famille des histone désacétylases de classe I qui catalyse l'élimination des groupes acétyle des résidus lysine sur les queues N‑terminales des histones de cœur (H2A, H2B, H3, H4), conduisant à la compaction de la chromatine et à la répression transcriptionnelle. Cette activité est centrale dans la régulation épigénétique de l'expression génique, la progression du cycle cellulaire et les processus développementaux. Références associées : PMID:10748112 • PMID:10922473 • PMID:10926844
• HDAC8 fonctionne au sein de grands complexes multiprotéiques pour exercer son activité désacétylase, et désacétyle en outre la sous-unité de cohésine SMC3, régulant ainsi la libération des complexes cohésine de la chromatine pendant la mitose. Références associées : PMID:22885700
• Au-delà de sa fonction désacétylase, HDAC8 possède une activité décrotonylase protéique, catalysant l'élimination des groupes crotonyle ((2E)-buténoyle) des histones, élargissant ainsi son rôle dans la modification épigénétique. Références associées : PMID:28497810
• La protéine peut contribuer à la contractilité des cellules musculaires lisses, indiquant un rôle régulateur non-histone. Références associées : PMID:15772115
• HDAC8 se localise principalement dans le noyau et sur les chromosomes, mais peut également être détectée dans le cytoplasme, suggérant un transport dynamique entre compartiments cellulaires.
• L'expression tissulaire est répandue mais à de faibles niveaux ; une expression plus élevée est observée dans le cœur, le cerveau, les reins, le pancréas, le foie, les poumons, le placenta et la prostate.
• La protéine est soumise à la phosphorylation et à l'épissage alternatif, et des mutations dans HDAC8 sont associées à des maladies, notamment le syndrome de Cornelia de Lange et les déficiences intellectuelles, soulignant son importance clinique.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène (un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1–100 de HDAC8 humain) cible la région N‑terminale ; envisagez de vérifier la spécificité de l'anticorps par des expériences de blocage peptidique ou de knockdown.
• Pour l'IHC‑P, effectuez une récupération antigénique en utilisant des méthodes thermiques (par exemple, tampon citrate, pH 6.0) et testez avec des tissus connus pour exprimer HDAC8, comme le cœur ou le cerveau.
• En IF/ICC, assurez une perméabilisation appropriée (par exemple, 0.1% Triton X‑100) et utilisez une contre-coloration nucléaire pour confirmer la localisation nucléaire attendue.
• Pour l'IP, optimisez les ratios anticorps/lysat et validez les partenaires co-immunoprécipités dans votre lignée cellulaire d'intérêt.
• L'ELISA peut nécessiter un titrage minutieux des anticorps de capture et de détection ; incluez un puits témoin négatif pour évaluer le bruit de fond.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat est prédite sur la base de l'homologie de séquence, mais une validation indépendante dans ces espèces est recommandée avant des études à grande échelle.

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