Anticorps monoclonal lapin GRB2 pour WB - P62993

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du GRB2

• GRB2 est une protéine adaptatrice non enzymatique qui sert de lien critique dans les cascades de signalisation des récepteurs de surface cellulaire vers les réponses cellulaires en aval, notamment l'expression génique et divers processus biologiques tels que l'immunité innée et adaptative, l'autophagie, la réparation de l'ADN et la nécroptose. Références connexes : PMID:11016927, PMID:11726515, PMID:37626338
• Dans les lymphocytes T, GRB2 se lie au LAT phosphorylé lors de l'engagement du TCR, recrutant SOS1 pour activer la voie KRAS/RAF1/MAPK, régulant ainsi l'activation, la différenciation et la fonction des lymphocytes T. Références connexes : PMID:9489702, PMID:12171928, PMID:25870599, PMID:36864087
• De même, dans les lymphocytes B, GRB2 amplifie la mobilisation du Ca2+ et l'activation de la kinase MAP ERK lors de son recrutement vers le BCR phosphorylé. Références connexes : PMID:25413232, PMID:29523808
• GRB2 régule la bascule entre l'autophagie et la nécrose programmée en interagissant avec des composants du nécrosome (par exemple, RIPK1) et des régulateurs de l'autophagie (par exemple, SQSTM1, BECN1). Références connexes : PMID:35831301, PMID:38182563
• Il module la biogenèse des miARN par la formation d'un complexe ternaire avec AGO2 et DICER1. Références connexes : PMID:37328606
• GRB2 participe à la réponse au stress de réplication et à la réparation dirigée par l'homologie (HDR) en stabilisant RAD51 aux fourches de réplication stagnantes et en régulant le recrutement de MRE11. Références connexes : PMID:34348893, PMID:38459011
• Un isoforme naturel (Grb3-3) manque de la fonction du domaine SH2 et agit comme un dominant négatif, inhibant la signalisation RAS-ERK et la prolifération cellulaire en entrant en compétition avec GRB2 pour la liaison à SOS1. Références connexes : PMID:36171279
• GRB2 est principalement localisé dans le cytoplasme mais également trouvé dans le noyau, les endosomes et l'appareil de Golgi, ce qui est cohérent avec ses rôles dans le trafic du signal.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination (liaison isopeptidique), et il possède des domaines SH2 et SH3 qui médient les interactions avec les protéines contenant de la phosphotyrosine et des motifs riches en proline.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène englobe le domaine SH3 C-terminal et la région adjacente, ce qui peut permettre de reconnaître le GRB2 de pleine longueur et ses isoformes ; vérifiez la réactivité dans votre système modèle.
• Pour le Western blot, GRB2 migre généralement à environ 25 kDa ; utilisez des contrôles de chargement appropriés et validez la spécificité de la bande dans des échantillons avec knockdown ou knockout.
• Dans l'immunoprécipitation, envisagez d'utiliser un protocole de réticulation (crosslinking) ou un anticorps secondaire spécifique de la chaîne légère pour éviter les interférences de la chaîne légère d'IgG d'environ 25 kDa.
• Pour l'immunohistochimie et l'immunofluorescence, l'optimisation des étapes de récupération de l'antigène et de blocage est recommandée pour chaque type de tissu.
• La réactivité croisée de l'anticorps avec le GRB2 de souris et de rat permet des études inter-espèces, mais confirmez avec des contrôles positifs et négatifs spécifiques à l'espèce.

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