Anticorps Monoclonal Lapin Glutathion Peroxydase 2 pour WB et ELISA - P18283

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Glutathion Peroxydase 2

• La Glutathion Peroxydase 2 (GPX2), également connue sous le nom de glutathion peroxydase gastro-intestinale, GPx-GI, GSHPx-GI, GPRP-2 et phospholipide hydroperoxyde glutathion peroxydase, est un membre de la famille des glutathion peroxydases qui fonctionne principalement dans la défense antioxydante cellulaire.
• La GPX2 catalyse la réduction dépendante du glutathion des hydroperoxydes, y compris le H2O2, l'hydroperoxyde de cumène, l'hydroperoxyde de tert-butyle et plusieurs hydroperoxydes dérivés d'acides gras, régulant ainsi l'homéostasie redox cellulaire ; elle ne réduit pas l'hydroperoxyde de phosphatidylcholine. Références connexes : PMID:36608588 PMID:8428933
• La protéine se localise dans le cytoplasme et le cytosol, ce qui est cohérent avec son rôle dans la détoxification intracellulaire des peroxydes.
• L'expression est spécifique aux tissus, principalement détectée dans le foie et le tractus gastro-intestinal, avec une absence dans le cœur et le rein, soulignant son rôle spécialisé dans l'équilibre redox du système digestif.
• La GPX2 contient un résidu de sélénocystéine (Sec) à son site actif, qui est essentiel pour son activité peroxydase et est codé par un codon UGA recodé.
• En tant que membre du protéome de référence avec une structure 3D connue, la GPX2 est une enzyme bien caractérisée dans la recherche sur le stress oxydatif et l'inflammation, en particulier dans les pathologies gastro-intestinales.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène correspond à une région centrale (aa 70-174) de la GPX2 humaine, qui évite les domaines transmembranaires ou fortement modifiés prédits ; envisagez de vérifier la spécificité de l'anticorps en utilisant des lysats de cellules surexprimant la GPX2 ou par interférence ARN (siRNA) dans une lignée cellulaire gastro-intestinale pertinente.
• Pour le Western blot, une SDS-PAGE réductrice est recommandée ; la taille de bande attendue est d'environ 22 kDa, mais peut varier légèrement en fonction des modifications post-traductionnelles ou de la préparation de l'échantillon.
• Pour l'ELISA, associez cet anticorps à un anticorps de détection correspondant reconnaissant un épitope non chevauchant ; validez le test sandwich en utilisant de la GPX2 humaine recombinante ou des extraits de tissus natifs.
• Puisque l'expression de la GPX2 est élevée dans le foie et l'intestin, utilisez des HepG2, des Caco-2 ou des homogénats de tissus comme témoins positifs ; les lysats de cœur ou de rein peuvent servir de témoins négatifs.
• Optimisez empiriquement la dilution de l'anticorps primaire, en commençant de 1:500 à 1:2000 pour le WB et de 0,5 à 2 µg/mL pour l'ELISA, et incluez des réactifs de détection secondaires appropriés.
• La réactivité croisée avec d'autres glutathion peroxydases (par exemple, GPX1, GPX3) n'a pas été signalée, mais confirmez la spécificité dans votre test en sondant les membres de la famille recombinants si disponibles.

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