Anticorps monoclonal de lapin Gli3 pour WB, IF/ICC, ELISA - P10071

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GLI3

• GLI3 code pour un facteur de transcription clé de la voie de signalisation Hedgehog, essentiel pour la structuration du cerveau, des membres et d'autres structures corporelles. Références associées : PMID:10075717 PMID:10375510 PMID:10693759
• La protéine GLI3 pleine longueur (GLI3FL/GLI3-190, ~190 kDa) agit comme activateur transcriptionnel lors de l'activation de Smoothened (SMO), mais est constitutivement transformée en sa forme répresseur majeure (GLI3R) en l'absence de signalisation Hedgehog. Références associées : PMID:10375510 PMID:10693759
• GLI3 reconnaît spécifiquement la séquence consensus d'ADN 5'-GACCACCCA-3' pour réguler directement l'expression des gènes cibles. Références associées : PMID:10075717
• La protéine se localise dynamiquement dans le noyau, le cytoplasme et le cil primaire, ce qui reflète son rôle dans la transduction du signal.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, la phosphorylation, la méthylation et l'ubiquitination, qui ajustent finement sa stabilité et son activité (mots-clés UniProt : Acétylation, Phosphoprotéine, Méthylation, Liaison isopeptidique, Conjugaison Ubl).
• Les mutations de GLI3 sont liées à des troubles du développement tels que le syndrome de Greig céphalopolysyndactylie (GCPS) et le syndrome de Pallister-Hall (PHS) (UniProt : Variante pathologique).
• Il est largement exprimé dans les tissus adultes, notamment le poumon, le côlon, la rate, le placenta, le testicule et le myomètre.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène (aa 1301–1580) se situe dans une région en aval des domaines à doigts de zinc ; vérifiez que l'épitope est présent à la fois dans les isoformes pleine longueur et traitées si vous étudiez les produits de clivage.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 170 kDa ; une électrophorèse et un transfert prolongés peuvent être nécessaires en raison de la grande taille de la protéine.
• Validez l'anticorps dans votre système d'échantillon (humain, souris ou rat) à l'aide de contrôles positifs appropriés (par exemple des lignées cellulaires avec une expression connue de GLI3 ou une activation de la voie Hedgehog).
• En immunofluorescence/ICC, attendez-vous à des motifs de coloration nucléaire, cytoplasmique ou ciliaire selon l'état de la signalisation.
• ELISA peut être utilisé pour la détection quantitative, mais les conditions optimales de revêtement et de détection doivent être déterminées empiriquement.

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