Anticorps polyclonal de lapin anti-GGT1 pour WB, IHC-P, ELISA - P19440

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de GGT1

• GGT1 est synthétisée sous forme de proenzyme de 61 kDa (UniProt : 61410 Da), qui est transformée en une chaîne lourde de 39 kDa et une chaîne légère de 24 kDa, lesquelles s’associent pour former l’enzyme active.
• Elle catalyse le clivage de la liaison gamma-glutamyle du glutathion extracellulaire (GSH) et des conjugués du glutathion, libérant du glutamate et de la cystéinyl-glycine, et régulant ainsi l’homéostasie du glutathion et l’approvisionnement en cystéine. Références associées : PMID:21447318, PMID:27791009
• GGT1 convertit le leucotriène C4 (LTC4) en LTD4, une étape essentielle de la synthèse des leucotriènes cystéinylés, qui sont de puissants médiateurs pro-inflammatoires. Références associées : PMID:17924658, PMID:21447318, PMID:7673200
• L’enzyme peut également catalyser des réactions de transpeptidation, en transférant le groupe gamma-glutamyle à des dipeptides ou à des acides aminés pour former de nouveaux composés gamma-glutamylés. Références associées : PMID:17924658, PMID:21447318, PMID:7673200
• GGT1 est une protéine transmembranaire de type II ancrée à la membrane plasmique par l’intermédiaire d’un domaine signal-ancre N-terminal, son domaine catalytique étant exposé dans l’espace extracellulaire.
• La protéine est fortement glycosylée et contient des modifications par l’acide sialique, essentielles à son repliement correct, à sa stabilité et à sa fonction enzymatique.
• Elle est fortement exprimée dans les reins et le foie, ainsi que dans le pancréas, l’estomac, l’intestin, le placenta et les poumons ; l’utilisation alternative des promoteurs produit des isoformes spécifiques des tissus.
• Une isoforme spécifique des poumons semble être catalytiquement inactive, ce qui suggère une régulation fonctionnelle dépendante des tissus.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène a été généré à partir d’une protéine de fusion recombinante correspondant aux acides aminés 370–569 de la GGT1 humaine (NP_038265.2), une région située dans la chaîne légère C-terminale. Cette conception suggère que l’anticorps peut détecter la chaîne légère de 24 kDa, la proenzyme de 61 kDa et éventuellement la chaîne lourde de 39 kDa, selon le traitement de l’échantillon et les conditions d’électrophorèse.
• Pour le western blot, les échantillons de contrôle positif peuvent inclure des lysats de rein ou de foie humains, qui expriment naturellement des niveaux élevés de GGT1.
• Dans les applications d’IHC-P, prévoyez un marquage de la membrane plasmique ; les conditions de révélation antigénique peuvent nécessiter une optimisation selon le type de tissu et la méthode de fixation.
• Une réactivité croisée de cet anticorps avec la GGT1 de souris et de rat a été rapportée, mais les utilisateurs doivent valider indépendamment la réactivité spécifique à chaque espèce et les conditions de l’essai.
• En raison de la nature multi-sous-unitaire de GGT1, envisagez d’analyser des échantillons réduits et non réduits afin de caractériser les profils de bandes.

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