Ac monoclonal de lapin anti-GCN2 - Q9P2K8

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de GCN2

• GCN2 (kinase 4 de la sous-unité alpha du facteur 2 d’initiation de la traduction eucaryote, également appelée protéine apparentée à GCN2) est un membre de la famille des kinases eIF-2-alpha et joue le rôle de capteur clé du stress métabolique.
• Phosphoryle la sous-unité alpha du facteur 2 d’initiation de la traduction eucaryote (eIF-2-alpha) en réponse à la carence en acides aminés, ce qui entraîne une atténuation globale de la traduction dépendante de la coiffe tout en favorisant la traduction d’ARNm répondant au stress, tels que ATF4. Références associées : PMID:25329545, PMID:32610081
• Agit comme un activateur de la réponse intégrée au stress (ISR), essentielle à l’adaptation cellulaire à la privation d’acides aminés.
• Module la progression du cycle cellulaire en réprimant la traduction de l’ARNm de la cycline D1 lors de l’activation de la réponse aux protéines mal repliées (UPR), et en stimulant la traduction de l’ARNm de CDKN1A/p21 en situation de carence en acides aminés. Référence associée : PMID:26102367
• Se localise principalement dans le cytoplasme.
• Est largement exprimée dans les tissus, avec une expression notable dans les poumons, les cellules musculaires lisses et les macrophages. Références associées : PMID:10504407, PMID:24292273
• Possède des fonctions antivirales : elle inhibe la traduction précoce des ARNm viraux lors d’une infection par les alphavirus (par homologie) et coordonne l’immunité adaptative médiée par les cellules dendritiques contre le virus de la fièvre jaune en situation de carence en acides aminés. Référence associée : PMID:24310610
• Est soumise à des modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation et la phosphorylation, et subit un épissage alternatif.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot (WB), tenir compte de la grande taille de la protéine (~187 kDa) ; envisager l’utilisation d’un gel SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple 6–8 %) et prolonger le temps de transfert.
• Valider les performances de l’anticorps dans des lysats de contrôle positif provenant de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat connues pour exprimer GCN2.
• Pour l’immunohistochimie sur coupes en paraffine (IHC-P) et l’ELISA, optimiser la récupération antigénique et les conditions d’analyse pour détecter la GCN2 cytoplasmique.
• Étant donné que l’immunogène couvre la région N-terminale (aa 1–300), vérifier que l’anticorps reconnaît la protéine complète ainsi que les éventuelles isoformes issues de l’épissage dans les échantillons biologiques pertinents.
• Utiliser des marqueurs de poids moléculaire et des contrôles de chargement appropriés pour l’analyse des protéines de haut poids moléculaire.

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