GBF1 Lapin pAb - Q92538

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du GBF1

• Le GBF1 agit comme un facteur d'échange de nucléotides guanyliques (GEF) pour les GTPases de la famille Arf, initiant l'enrobage des vésicules en générant des ARF activés par l'échange GDP vers GTP. Il est recruté aux membranes du cis-Golgi de manière dépendante de l'Arf-GDP et est régulé par ARF1, ARF3, ARF4 et ARF5. Références connexes : PMID:12047556, PMID:12808027, PMID:16926190
• Il est essentiel pour le recrutement du complexe d'enrobage COPI aux sites de sortie du RE, au compartiment intermédiaire entre le RE et l'appareil de Golgi (ERGIC) et au cis-Golgi, et il médie le transport rétrograde dépendant des vésicules COPI de ces compartiments vers le RE. Références connexes : PMID:12047556, PMID:12808027, PMID:16926190
• Dans le réseau trans-Golgien, le GBF1 recrute les adaptateurs GGA1, GGA2, GGA3, BIG1, BIG2 et le complexe AP-1, facilitant le transport dépendant de la clathrine ; cette fonction nécessite probablement l'activité GEF vers ARF4 et ARF5. Références connexes : PMID:23386609
• Il est nécessaire pour l'assemblage de l'appareil de Golgi, et sa phosphorylation par l'AMPK déclenche la désassemblage de l'appareil de Golgi pendant la mitose et le stress. Références connexes : PMID:12808027, PMID:18003980, PMID:18063581, PMID:23418352
• Le GBF1 pourrait participer au recrutement dépendant du COPI de PNPLA2 vers les gouttelettes lipidiques et contribue au maintien de la morphologie mitochondriale. Références connexes : PMID:19461073, PMID:22185782, PMID:25190516
• Dans les neutrophiles, il médie la chimiotaxie stimulée par les RCP et la production de superoxyde en recrutant et activant l'ARF1 au bord d'attaque, et en facilitant l'assemblage du complexe NADPH oxydase. Références connexes : PMID:22573891
• Le GBF1 est exprimé de manière ubiquitaire et est associé à la maladie de Charcot-Marie-Tooth et à la neurodégénérescence.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Compte tenu du poids moléculaire élevé du GBF1 (206 kDa), envisagez d'utiliser des gels SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple, 6-8 %) pour une résolution optimale en Western blot.
• Validez l'anticorps dans des lignées cellulaires humaines et de souris pertinentes connues pour exprimer le GBF1 ; l'expression ubiquitaire suggère que la plupart des types cellulaires sont appropriés.
• Pour l'immunofluorescence, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour préserver la morphologie de l'appareil de Golgi et permettre l'accès de l'anticorps à cette protéine associée à la membrane.
• L'immunogène correspond aux acides aminés 1-85 de l'extrémité N-terminale, ce qui peut fournir une spécificité entre les isoformes ; vérifiez cela dans votre système expérimental.

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