Anticorps monoclonal de lapin anti-Formyl-Histone H2B-K120 (P62807/Q16778) pour WB, IHC-P, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Formyl-Histone H2B

L'histone H2B est un composant central du nucléosome, où elle enveloppe et compacte l'ADN en chromatine, jouant ainsi un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. L'accessibilité dynamique de l'ADN est régie par le "code histone", un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT) sur les histones. Références associées : UniProt P62807, UniProt Q16778

L'Histone H2B humaine subit de nombreuses MPT, notamment l'acétylation (par ex. à K6, K12, K16, K21), la crotonylation (K12), la phosphorylation (S15) et la formylation à K120. La formylation à K120 est une modification émergente qui peut influencer subtilement l'architecture de la chromatine et l'expression des gènes, bien que sa signification biologique complète fasse encore l'objet d'investigations actives. Références associées : PMID:16283522, PMID:16627869, PMID:21925322, PMID:12757711

En plus de son rôle structurel, H2B présente une large activité antibactérienne et pourrait contribuer à la barrière antimicrobienne de l'épithélium colique et à l'activité bactéricide du liquide amniotique. Références associées : UniProt P62807, UniProt Q16778

H2B se localise principalement dans le noyau et est associée aux chromosomes. Le génome humain code plusieurs variants de H2B, notamment H2B type 1-C/E/F/G/I (P62807) et H2B type 2-E (Q16778), qui partagent des séquences hautement conservées. Le peptide immunogène couvre une région conservée parmi ces isoformes, ce qui soutient la large réactivité croisée prédite. Références associées : UniProt P62807, UniProt Q16778

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant à l'Histone H2B humaine avec formylation à la lysine 120. L'anticorps est censé reconnaître spécifiquement la formyl-H2B-K120 ; envisagez d'utiliser un peptide non formylé ou une déformylation enzymatique comme contrôle négatif pour confirmer la spécificité.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 14 kDa est attendue. Utilisez des extraits nucléaires ou des préparations enrichies en histones. Il est recommandé d'inclure un marqueur de faible poids moléculaire et un échantillon témoin (par ex., non traité vs traité avec un inhibiteur de formylase).
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), une récupération antigénique peut être nécessaire pour exposer l'épitope nucléaire dans les coupes fixées au formol et incluses en paraffine. Une coloration nucléaire doit être observée ; validez avec des contrôles tissulaires appropriés.
• Pour l'ELISA, immobilisez le peptide formylé et utilisez un peptide non modifié comme contrôle pour évaluer la spécificité de liaison. Optimisez les conditions d'immobilisation et la dilution de l'anticorps en fonction de la matrice de l'échantillon.
• En raison de l'identité élevée des séquences, l'anticorps est prédit pour réagir de manière croisée avec l'H2B humain, murin et de rat ; cependant, une validation dans l'espèce et le système d'échantillon concernés est conseillée.
• Évitez les agents de blocage non spécifiques qui pourraient masquer la modification de petite molécule ; des bloqueurs sans BSA ou des stratégies de blocage alternatives peuvent être envisagées si un bruit de fond est observé.

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