Anticorps Monoclonaux de Lapin anti-Humain/Singe CD45 conjugués à la FITC pour FC - P08575

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du CD45

• Le CD45, également connu sous le nom de PTPRC, est une phosphatase protéique-tyrosine de type récepteur qui sert d'antigène leucocytaire commun (L-CA ou T200). Il agit comme un régulateur positif de l'activation des cellules T via le récepteur d'antigène lors de sa liaison à DPP4, et est nécessaire pour une coactivation efficace des cellules T. Références connexes : PMID:35767951
• La région intracellulaire abrite deux domaines phosphatases : le premier domaine possède une activité enzymatique, tandis que le second module la spécificité du substrat. Le CD45 déphosphoryle des intermédiaires de signalisation clés tels que SKAP1, FYN et LYN, ajustant ainsi finement les seuils de signalisation du récepteur des cellules T.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes (1–8) avec des domaines extracellulaires variables. Dans les thymocytes, les isoformes 1, 2, 3, 5 et 7 sont détectées, alors que les isoformes 4, 6 et 8 sont absentes, indiquant une expression d'isoforme étroitement régulée lors du développement des cellules T.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire, les radeaux membranaires et la synapse immunologique, où le CD45 interagit dynamiquement avec les cellules présentatrices d'antigène pour moduler l'activation des cellules T et limiter l'auto-réactivité.
• En tant que protéine fortement glycosylée et phosphorylée, le CD45 présente une plage de poids moléculaire apparent de 131 à 147 kDa sur SDS-PAGE, reflétant des modifications post-traductionnelles étendues qui influencent sa fonction et sa diversité d'isoformes.
• Le CD45 participe également aux interactions hôte-pathogène : il agit comme un récepteur pour la protéine UL11 du cytomégalovirus humain, entraînant une altération de la prolifération des cellules T lors de l'engagement viral.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire spécifique et la configuration de votre instrument.
• Utilisez des PBMC humains ou des suspensions lymphocytaires de cynomolgus comme témoins positifs ; le CD45 est fortement exprimé sur tous les sous-ensembles de leucocytes, fournissant un marqueur de gating robuste.
• Intégrez ce conjugué FITC dans des panneaux multicolores aux côtés de marqueurs pour les cellules T, les cellules B et les cellules myéloïdes pour permettre un immunophénotypage complet.
• Assurez-vous que le cytomètre est équipé d'un laser de 488 nm et de filtres appropriés pour la détection FITC.
• Validez le marquage avec un contrôle d'isotype approprié et incluez un blocage des récepteurs Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• Notez que l'épitope correspond au domaine extracellulaire (aa 26–577), qui est partagé entre plusieurs isoformes de CD45, soutenant une reconnaissance large des leucocytes.

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