Ac monoclonal de lapin anti-F4/80 pour IF, IHC-P, ELISA - Q61549

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de F4/80

• F4/80, codé par le gène Adgre1 (Emr1), est un récepteur d’adhésion couplé aux protéines G (GPCR) appartenant à la sous-famille EGF-TM7.
• La protéine complète est une glycoprotéine de surface cellulaire d’un poids moléculaire d’environ 102 kDa, contenant plusieurs domaines de type EGF et un domaine à sept segments transmembranaires.
• F4/80 fonctionne comme un récepteur orphelin supposé jouer un rôle dans l’adhésion cellulaire et les interactions cellule-cellule, notamment au sein du système immunitaire.
• Il est spécifiquement exprimé à la surface des macrophages, avec des niveaux particulièrement élevés dans les macrophages matures résidents des tissus, mais il est absent des macrophages situés dans les zones à lymphocytes T des ganglions lymphatiques et de la rate.
• Une expression de faible niveau est également détectée dans les monocytes sanguins, ce qui fait de F4/80 un marqueur pan-macrophagique bien établi chez la souris.
• Le récepteur pourrait contribuer au développement et à la fonction des lymphocytes T régulateurs (Treg), faisant le lien entre l’immunité innée et l’immunité adaptative.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation et la formation de ponts disulfure, caractéristiques des protéines contenant des domaines de type EGF et importantes pour la stabilité structurale.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est constitué d’un fragment recombinant (aa 367–645) provenant de la région extracellulaire de F4/80 de souris et ciblant une séquence potentiellement moins sujette aux interférences liées à la glycosylation ; vérifiez que cet épitope est exposé dans vos échantillons fixés.
• Pour l’immunofluorescence (IF) sur des coupes incluses en paraffine (IF-P), envisagez une récupération antigénique avec un tampon citrate (pH 6,0) ou de l’EDTA (pH 9,0), et optimisez les conditions d’incubation de l’anticorps primaire en fonction du type de tissu.
• Pour l’immunohistochimie sur coupes de paraffine (IHC-P), validez l’anticorps sur un témoin positif connu pour F4/80 (par exemple, les cellules de Kupffer du foie de souris ou les macrophages de la pulpe rouge splénique) et incluez un contrôle d’isotype afin d’évaluer la coloration de fond.
• Lors de la réalisation d’un ELISA, utilisez l’anticorps comme réactif de capture ou de détection dirigé contre la protéine recombinante F4/80 de souris et vérifiez également la réactivité avec F4/80 de rat si l’essai est destiné à des échantillons de rat.
• En tant qu’anticorps monoclonal de lapin, il offre une bonne uniformité entre les lots ; toutefois, confirmez sa réactivité spécifique dans votre système expérimental, en particulier si vous utilisez des modèles knockout ou knockdown.

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