Anticorps polyclonal de lapin anti-eNOS pour WB, IF-P, ELISA - P29474

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’eNOS

• Produit de l’oxyde nitrique (NO), une molécule clé de signalisation qui induit la relaxation des muscles lisses vasculaires via une transduction du signal médiée par le GMPc, essentielle à la régulation de la pression artérielle. Références associées : PMID:1378832
• Médie l’angiogenèse induite par le VEGF dans les vaisseaux coronaires et favorise la coagulation sanguine par l’activation des plaquettes.
• Un variant d’épissage naturel est dépourvu d’activité eNOS et peut réduire l’activité de l’eNOS fonctionnelle en formant des hétérodimères inactifs.
• Se localise principalement à la membrane plasmique et dans les cavéoles, mais est également présent dans le cytoplasme, associé au cytosquelette, ainsi que dans l’appareil de Golgi.
• Est fortement exprimé dans les plaquettes, le placenta, le foie et les reins, ce qui reflète ses rôles dans l’homéostasie vasculaire et la fonction plaquettaire.
• Est régulé par plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, la myristoylation et la palmitoylation, et nécessite des cofacteurs tels que le FAD, la FMN, l’hème et le zinc pour son activité.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre la région C-terminale (aa 1000-1203) de l’eNOS humaine, ce qui peut permettre la détection des variants de pleine longueur et tronqués ; il est recommandé de vérifier la spécificité dans des modèles cellulaires pertinents exprimant l’eNOS.
• Pour le Western blot, une bande migrant à environ 133 kDa est attendue. Utilisez des marqueurs de poids moléculaire à large gamme et optimisez la préparation des échantillons (par exemple, en utilisant des conditions réductrices) afin d’obtenir des résultats clairs.
• En immunofluorescence (échantillons inclus en paraffine), des protocoles de récupération antigénique peuvent être nécessaires ; des essais préliminaires avec des contrôles positifs connus (par exemple, des cellules endothéliales de veine ombilicale humaine) sont recommandés.
• L’anticorps réagit également avec l’eNOS de souris et de rat en raison de la conservation des séquences ; validez-le avec des lysats tissulaires ou cellulaires appropriés provenant de ces espèces avant toute comparaison quantitative.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter des titrages en damier afin de déterminer les concentrations optimales de l’antigène de revêtement et de l’anticorps ; l’anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection dans les immunodosages en sandwich.

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