pAb de lapin anti-eIF5A pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P63241

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'eIF5A

• eIF5A (facteur d'initiation de la traduction eucaryotique 5A-1) est un facteur de traduction hautement conservé qui favorise l'élongation et la terminaison, en sauvant les ribosomes bloqués sur les polyprolines ou d'autres motifs. Références associées : PMID:33547280
• Il se lie entre les sites E et P du ribosome, facilitant le transfert peptidique lors de l'étape de queue CAT en tant que cofacteur du contrôle qualité ribosomique (RQC).
• eIF5A est impliqué dans la dynamique de l'actine, la progression du cycle cellulaire et la dégradation des ARNm, et contribue à la réponse au stress et au maintien de l'intégrité de la paroi cellulaire. Références associées : PMID:16987817
• En complexe avec la synténine SDCBP, il régule l'apoptose dépendante de p53/TP53 et module l'apoptose médiée par le TNF. Références associées : PMID:15371445 PMID:15452064 PMID:17187778
• eIF5A médie les effets des polyamines sur l'extension des processus neuronaux et la survie, et est nécessaire à l'autophagie en améliorant la traduction d'ATG3 sur un motif spécifique ASP-ASP-Gly, favorisant la lipidation de LC3B. Références associées : PMID:17360499 PMID:29712776
• En tant que cofacteur cellulaire des protéines Rex du HTLV-1 et Rev du VIH-1, eIF5A est essentielle pour l'export nucléaire des ARNm viraux non épissés / partiellement épissés.
• La protéine se localise dans le cytoplasme, le noyau et la membrane du réticulum endoplasmique, et est soumise à des modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation et l'hypusination (formation d'hypusine sur le Lys-50). Elle est exprimée dans les cellules endothéliales de la veine ombilicale et diverses lignées cellulaires cancéreuses.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la protéine eIF5A humaine de longueur complète (acides aminés 1-154), qui peut détecter à la fois la forme précurseur et la forme mature (hypusinée). L'hypusination du Lys-50 ajoute environ 113 Da, ce qui peut entraîner un léger décalage sur SDS-PAGE ; si vous avez besoin de distinguer ces formes, pensez à utiliser des échantillons fraîchement préparés et un système de gel adapté.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit est d'environ 17 kDa ; assurez-vous d'avoir des conditions de transfert adaptées pour les protéines de faible poids moléculaire.
• eIF5A est phylogénétiquement conservée ; la réactivité croisée avec la souris a été confirmée, tandis que les autres espèces doivent être validées expérimentalement.
• En immunofluorescence ou en immunohistochimie, eIF5A peut présenter une coloration à la fois cytoplasmique et nucléaire selon le type cellulaire et la fixation ; optimisez la perméabilisation et validez dans votre système d'échantillon approprié.
• Les tests immuno-enzymatiques comme l'ELISA peuvent nécessiter une titration ; il est recommandé d'inclure des contrôles positifs (par exemple, lysats de HeLa, Jurkat) et négatifs.

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