Anticorps monoclonal de lapin anti-eIF4A1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P60842

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’eIF4A1

• L’eIF4A1 est une hélicase ARN dépendante de l’ATP et un composant essentiel du complexe d’initiation de la traduction eIF4F. Elle reconnaît la structure coiffe de l’ARNm et facilite la liaison du ribosome.
• Elle déroule les structures secondaires de l’ARN dans la 5'-UTR des ARNm, permettant ainsi le balayage efficace par la petite sous-unité ribosomique à la recherche du codon initiateur et favorisant ainsi l’initiation de la traduction dépendante de la coiffe. Références associées : PMID:20156963
• Grâce à son activité hélicase, l’eIF4A1 favorise la prolifération et la croissance cellulaires, agissant comme un régulateur clé de l’expression génique au niveau traductionnel.
• L’eIF4A1 se localise dans le cytoplasme, la région périnucléaire et la membrane cellulaire, et peut également être présente dans les granules de stress en conditions de stress cellulaire.
• La protéine subit diverses modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation, la phosphorylation et l’ubiquitination, qui peuvent moduler son activité et ses interactions.
• Codée par le gène EIF4A1 (également connu sous les noms DDX2A ou EIF4A), l’épissage alternatif produit plusieurs isoformes de cette hélicase DEAD-box conservée.
• L’eIF4A1 participe aux interactions hôte-virus, car de nombreux virus détournent la machinerie de traduction de l’hôte pour synthétiser leurs propres protéines.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-100) de l’eIF4A1 humain ; l’anticorps peut donc reconnaître spécifiquement l’épitope N-terminal. Confirmez sa spécificité dans votre système expérimental.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande proche de 46 kDa (poids moléculaire calculé par UniProt : 46,2 kDa), bien que la migration réelle puisse varier selon la composition du gel et la préparation de l’échantillon.
• En immunohistochimie (IHC-P) et en immunofluorescence (IF/ICC), optimisez les conditions de récupération antigénique et de perméabilisation afin de détecter l’eIF4A1 dans ses pools cytoplasmiques et associés à la membrane.
• Il est rapporté que l’anticorps présente une réactivité croisée avec l’eIF4A1 de souris, de rat et de singe. Validez toujours la réactivité et le rapport signal/bruit dans les échantillons provenant de ces espèces avant d’entreprendre des études à grande échelle.
• Pour l’immunoprécipitation (IP) et l’ELISA, envisagez d’utiliser des lysats frais ou correctement conservés afin de préserver les interactions et la conformation des protéines.

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