Anticorps polyclonal de lapin anti-EGFR pour WB, IP, ELISA - P00533

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EGFR

• L'EGFR est un récepteur tyrosine kinase appartenant à la famille des ErbB (ErbB-1/HER1). Le gène de l'EGFR code plusieurs isoformes ; l'isoforme 2 peut agir comme antagoniste de l'action de l'EGF.
• Liaison au ligand : l'EGFR se lie aux ligands de la famille de l'EGF, incluant l'EGF, le TGF-alpha, l'AREG, l'épigénine, le BTC, l'épiréguline et l'HBEGF, déclenchant l'homo- et hétérodimérisation du récepteur et son autophosphorylation (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029). Références associées : PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• L'EGFR activé recrute des protéines adaptatrices et transmet le signal par les principales cascades : RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC, STAT, et potentiellement NF-kappa-B (PubMed:27153536, PubMed:11116146). Références associées : PMID:27153536, PMID:11116146
• L'EGFR phosphoryle directement d'autres protéines, comme la RGS16 (PubMed:11602604) et la MUC1 (PubMed:11483589), assurant la liaison avec la signalisation des récepteurs couplés aux protéines G et les voies de la bêta-caténine. Références associées : PMID:11602604, PMID:11483589
• Il régule la migration cellulaire par interaction avec CCDC88A/GIV (PubMed:20462955) et joue un rôle dans l'apprentissage, la mémoire et la signalisation de la douleur (par similarité). Références associées : PMID:20462955
• Localisation subcellulaire : membrane cellulaire, membrane du réticulum endoplasmique, membrane de l'appareil de Golgi, membrane nucléaire, membrane des endosomes, endosome, noyau, et également sécrété.
• Exprimé de manière ubiquitaire ; l'isoforme 2 est exprimé supplémentairement dans les cancers de l'ovaire.
• Agit comme récepteur pour l'entrée du virus de l'hépatite C (VHC), médiant l'infection des hépatocytes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à un peptide C-terminal (aa 1100–1200) de l'EGFR humain ; l'anticorps est censé reconnaître l'EGFR complet et potentiellement les principales isoformes.
• Pour le Western blot, utilisez un contrôle positif tel que le lysat cellulaire A431 ; le poids moléculaire prédit est d'environ 134 kDa, mais la glycoprotéine peut migrer plus lentement du fait des modifications post-traductionnelles.
• Envisagez l'utilisation d'inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver l'état de phosphorylation, car l'EGFR est fortement phosphorylé après activation.
• Pour l'immunoprécipitation, validez le conjugué anticorps-bille et optimisez les conditions de lavage pour réduire le bruit de fond.
• La réaction croisée avec la souris et le rat a été démontrée ; cependant, nous recommandons de vérifier la réactivité dans votre modèle expérimental spécifique.
• Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, la cohérence entre lots doit être évaluée pour les applications quantitatives critiques.

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