Anticorps polyclonal de lapon contre le récepteur EGF (spécifique de la délétion E746-A750) pour WB et ELISA - P00533

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du récepteur EGF (EGFR)

• L'EGFR est un récepteur tyrosine kinase qui se lie à plusieurs ligands de la famille EGF (par ex. EGF, TGFA, AREG, épigène, BTC, EREG, HBEGF). La liaison du ligand déclenche l'homo‑/hétérodimérisation, l'autophosphorylation et l'activation des voies de signalisation en aval, notamment RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC, STAT et NF‑kappa‑B. Cet anticorps est spécifique du mutant à délétion E746‑A750, que l'on retrouve fréquemment dans le cancer du poumon non à petites cellules. Références associées : PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029 PMID:11116146 PMID:11602604 PMID:11483589 PMID:20462955
• L'isoforme 2 de l'EGFR peut agir comme antagoniste de l'action de l'EGF, tandis que l'isoforme canonique 1 est le récepteur de signalisation majoritaire.
• L'EGFR est localisé sur la membrane cellulaire, mais il réside également dans le réticulum endoplasmique, l'appareil de Golgi, le noyau, les endosomes et peut être sécrété.
• La protéine subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment phosphorylation, glycosylation, hydroxylation, palmitoylation, méthylation et ubiquitination, qui régulent son activité et son trafic intracellulaire.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire, l'isoforme 2 étant en outre présente dans les cancers ovariens.
• L'EGFR sert également de récepteur cellulaire hôte pour l'entrée du virus de l'hépatite C (VHC), en médiant la formation du complexe CD81-CLDN1 et la fusion membranaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante contenant la délétion E746-A750, ce qui indique que l'anticorps est conçu pour reconnaître sélectivement l'épitope mutant. Les expérimentateurs doivent confirmer la spécificité en utilisant des cellules exprimant l'EGFR de type sauvage comme contrôle négatif.
• Pour le Western blot, il est recommandé d'utiliser des lysats protéiques de lignées de cellules cancéreuses humaines connues pour porter la mutation EGFR E746‑A750del (par ex. HCC827, H1975) ou une protéine EGFR mutante recombinante.
• Pour l'ELISA, il est conseillé d'effectuer un revêtement avec la protéine recombinante EGFR E746‑A750del. Il faut prendre en compte qu'une réactivité croisée avec l'EGFR de type sauvage peut se produire ; un blocage approprié et une optimisation de la dilution sont nécessaires.
• Les concentrations de travail optimales pour WB et ELISA doivent être déterminées empiriquement ; les dilutions de départ typiques pour les anticorps polyclonaux vont de 1:500 à 1:2000.

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