EDA Lapin pAb pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q92838

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Ectodysplasine-A (EDA)

• Le gène EDA code pour la protéine transmembranaire ectodysplasine-A, une protéine membranaire de type II appartenant à la famille du facteur de nécrose tumorale (TNF). Elle peut être clivée par protéolyse pour libérer un ectodomaine soluble.
• EDA fonctionne comme ligand pour les récepteurs à domaine de mort EDAR et EDA2R, déclenchant des voies de signalisation essentielles aux interactions épithélio-mésenchymateuses lors de la morphogenèse des organes ectodermiques (PubMed:11039935, PubMed:27144394, PubMed:34582123). Références associées : PMID:11039935 PMID:27144394 PMID:34582123
• Épissage alternatif génère plusieurs isoformes avec des spécificités réceptrices distinctes : l'isoforme 1 se lie exclusivement à EDAR, tandis que l'isoforme 3 se lie exclusivement à EDA2R.
• Au niveau sous-cellulaire, EDA est ancrée à la membrane cellulaire via un domaine transmembranaire N-terminal, mais est également sécrétée après clivage au niveau d'une paire de résidus basiques.
• EDA est exprimée en faible abondance, principalement dans les cellules d'origine ectodermique comme les kératinocytes, les follicules pileux et les glandes sudoripares ; on la trouve également dans le cœur, le foie, les muscles, le pancréas, la prostate adultes et dans les tissus fœtaux.
• Les mutations du gène EDA sont liées à la dysplasie ectodermique hypohidrotique liée à l'X (XLHED), une pathologie caractérisée par un développement défectueux des dents, des cheveux et des glandes sudoripares.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation et la formation de ponts disulfures, qui sont essentielles au bon repliement et à la trimérisation via son domaine de type collagène.
• EDA pourrait également participer à l'adhésion cellulaire, comme le suggèrent les similarités de séquence et les études in vitro.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à un segment de l'ectodomaine d'EDA (acides aminés 62–182), qui est probablement exposé dans la forme soluble et peut générer des anticorps reconnaissant à la fois les isoformes d'EDA liées à la membrane et les isoformes sécrétées.
• Pour le Western blot (WB), attendez une bande d'environ 41 kDa pour la protéine entière ; les isoformes clivées ou les isoformes alternatives peuvent produire des bandes supplémentaires. Incluez des lysats de contrôle positif appropriés issus de tissus humains, de souris ou de rat connus pour exprimer l'EDA (par exemple, kératinocytes, peau).
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'immunofluorescence (IF/ICC), optimisez la récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps, car l'expression d'EDA est généralement faible. Validez l'essai sur des tissus riches en structures ectodermiques, comme la peau ou les follicules pileux.
• En tant qu'anticorps polyclonal de lapin, une variabilité d'un lot à l'autre est possible ; incluez un échantillon contrôle standard dans chaque essai pour surveiller la cohérence des résultats.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat suggère des épitopes conservés ; validez l'anticorps dans l'espèce et le contexte tissulaire concernés avant toute utilisation intensive.
• Pour les applications ELISA, cet anticorps peut servir de réactif de capture ou de détection, mais l'association avec un anticorps monoclonal ou une autre paire validée est recommandée pour les tests sandwich.

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