ECE1 Lapin pAb - P42892

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ECE1

• L'ECE1 est une métalloprotéase à zinc liée à la membrane qui catalyse la conversion de la big endothéline-1 en endothéline-1, un peptide vasoconstricteur puissant.
• Elle appartient à la famille M13 des métalloprotéases et contient des caractéristiques structurelles incluant un pont disulfure, des sites de glycosylation et de multiples sites de phosphorylation.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes (A, B, C, D) qui partagent le domaine catalytique mais diffèrent par leurs séquences N-terminales et leur distribution tissulaire.
• La protéine se localise sur la membrane cellulaire via une hélice transmembranaire unique d'ancrage du signal, le domaine catalytique étant orienté vers l'espace extracellulaire/luminal.
• L'ECE1 est largement exprimée ; des niveaux élevés sont détectés dans les cellules endothéliales, le placenta, les poumons, le cœur et la glande surrénale, avec des distributions spécifiques par isoforme dans le foie, les reins, les testicules et les cellules musculaires lisses.
• Les mutations du gène ECE1 sont liées à la maladie de Hirschsprung, une maladie développementale du système nerveux entérique, ce qui souligne son rôle au-delà de la vasorégulation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (acides aminés 670-770) de l'ECE1 humaine, qui inclut une partie du domaine catalytique et peut reconnaître plusieurs isoformes.
• Pour le Western blot, attendez une bande à environ 87 kDa dans des conditions réductrices ; envisagez d'utiliser des inhibiteurs de protéase frais et d'éviter l'ébullition pour préserver les épitopes.
• En IHC-P et IF/ICC, optimisez les protocoles de fixation et de perméabilisation pour prendre en compte la localisation membranaire de l'ECE1 ; la récupération d'antigène par voie enzymatique peut améliorer la détection.
• Pour les tests ELISA, le revêtement avec l'immunogène recombinant ou un peptide apparenté peut servir de contrôle positif ; des tests de pré-absorption sont recommandés pour confirmer la spécificité.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec l'ECE1 de souris et de rat, mais ses performances doivent être validées dans le tissu ou la lignée cellulaire concernée avant toute étude quantitative.

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