Anticorps polyclonal de lapin anti-histone H3-K36 diméthylé (Q16695 / P68431) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ChIP-seq

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H3

• L'histone H3 est un composant central du nucléosome, enroulant et compactant l'ADN en chromatine. Cela limite l'accessibilité de l'ADN aux machineries cellulaires et joue donc un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. L'accessibilité de l'ADN est régulée par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles, collectivement appelées code des histones, et par le remodelage des nucléosomes.
• L'histone canonique H3.1 (UniProt P68431) est codée par plusieurs gènes dépendants de la réplication (H3C1, H3C2, H3C3, H3C4, H3C6, H3C7, H3C8, H3C10, H3C11, H3C12). La variante H3.1t (UniProt Q16695, gène H3-4), également connue sous le nom de H3t ou H3/g, est exprimée dans les cellules testiculaires.
• La diméthylation de la Lys36 (numérotation conventionnelle ; correspond à la Lys37 dans la séquence précurseur) est une modification post-traductionnelle spécifique sur la queue N-terminale de l'histone H3. Cette modification contribue au code des histones et est impliquée dans l'élongation transcriptionnelle et le maintien de l'intégrité du génome. Références associées :
  • PMID:15983376
  • PMID:16185088
  • PMID:16267050
  • PMID:16627869
  • PMID:17194708
• L'histone H3.1 et l'histone H3.1t se localisent toutes deux dans le noyau et sur les chromosomes, conformément à leurs rôles dans la structure et la fonction de la chromatine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène était un peptide synthétique contenant la Lys36 diméthylée de l'histone H3 humaine, conçu pour conférer une spécificité élevée à cette modification. Pour les applications critiques, envisagez de vérifier la spécificité par des essais de compétition peptidique ou par une analyse Western blot d'extraits d'histones présentant des états de méthylation connus.
• En Western blot (WB), une bande à environ 15 kDa est attendue. Optimisez la dilution de l'anticorps et validez dans le système d'échantillon pertinent, en utilisant des contrôles de charge appropriés.
• Pour l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP et ChIP-seq), confirmez l'enrichissement de l'H3K36 diméthylée au niveau des corps de gènes activement transcrits ou d'autres cibles génomiques établies. Incluez des loci de contrôle positif et négatif appropriés pour garantir des performances de qualité ChIP.
• En immunohistochimie (IHC-P) et en immunofluorescence (IF/ICC), les méthodes de fixation et de récupération d'antigène peuvent affecter l'accessibilité de l'épitope ; envisagez de tester différentes conditions pour obtenir un signal optimal.

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