Anticorps polyclonal de lapin anti-Dimethyl-eEF1A-K55 (P68104/Q05639) pour WB et ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'eEF1A

• L'eEF1A (facteur d'élongation eucaryote 1A) existe sous deux isoformes, eEF1A1 (gène EEF1A1, GeneID : 1915) et eEF1A2 (gène EEF1A2, GeneID : 1917), deux facteurs d'élongation de la traduction hautement conservés. Ils catalysent la liaison GTP-dépendante de l'aminoacyl-ARNt au site A ribosomal pendant l'élongation de la synthèse protéique PMID:26593721, PMID:26651998, PMID:36123449, PMID:36264623, PMID:36638793.
• Au-delà de la traduction, l'eEF1A1 favorise le regroupement de l'actine pour l'organisation du cytosquelette et, dans les cellules T auxiliaires de type 1, forme un complexe avec TXK et PARP1 pour réguler positivement la transcription d'IFNG PMID:17177976. EEF1A1 est également requis pour la traduction des protéines virales lors de l'infection par le SARS-CoV-2 PMID:33495306.
• EEF1A1 est exprimé de manière large, tandis qu'EEF1A2 se trouve principalement dans le cerveau, le cœur et le muscle squelettique. Au niveau subcellulaire, EEF1A1 se localise dans le cytoplasme, le noyau, le nucléole et la membrane cellulaire ; EEF1A2 se localise à la membrane du réticulum endoplasmique PMID:19158340, PMID:8650580, PMID:26497934, PMID:36697828.
• La lysine 55 (K55) est un site de diméthylation conservé (N6,N6-diméthyllysine) à la fois dans eEF1A1 et eEF1A2, comme identifié par protéomique PMID:30143613, PMID:30612740. Dans eEF1A2, K55 peut également être triméthylée. Ces modifications peuvent réguler les interactions protéiques et la fidélité de la traduction.
• Des mutations dans EEF1A2 sont liées à des troubles neurodéveloppementaux tels que l'épilepsie et la déficience intellectuelle, soulignant l'importance biomédicale de la régulation d'eEF1A2.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps a été généré contre un peptide K55 diméthylé de l'eEF1A ; il devrait reconnaître spécifiquement la forme diméthyl-K55. Confirmer la spécificité par compétition peptidique (diméthylé vs non modifié) ou en traitant les échantillons avec une déméthylase.
• Pour le WB, l'eEF1A1 (~50,1 kDa) et l'eEF1A2 (~50,5 kDa) migrent à ~50 kDa. Utiliser des conditions standard de SDS-PAGE et de transfert. Valider dans des lignées cellulaires humaines (par exemple, HeLa pour EEF1A1, SH-SY5Y pour EEF1A2).
• En ELISA, revêtir avec le peptide diméthylé ou un lysat cellulaire ; inclure des contrôles non méthylés pour évaluer la réactivité croisée.
• Compte tenu du rôle de l'eEF1A dans la traduction, la biologie du cancer et la réplication virale, cet anticorps peut aider les études sur la régulation dépendante de la méthylation dans diverses conditions physiologiques et pathologiques.

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