Cytochrome c mAb de lapin - P99999

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du Cytochrome c

• Le Cytochrome c est une petite protéine à hème (poids moléculaire ~11,7–12 kDa) codée par le gène CYCS chez l'homme. C'est un transporteur d'électrons très bien conservé, essentiel à la fonction mitochondriale et à l'apoptose.
• En tant que composant de la chaîne de transport d'électrons, le Cytochrome c transfère les électrons entre le Complexe III (cytochrome c réductase) et le Complexe IV (cytochrome c oxydase) dans l'espace intermembranaire mitochondrial.
• Au-delà de son rôle respiratoire, le Cytochrome c est un médiateur essentiel de l'apoptose. La libération du Cytochrome c des mitochondries dans le cytosol déclenche l'assemblage de l'apoptosome, activant la caspase-9 et initiant la cascade de caspases qui conduit à la mort cellulaire.
• Dans des conditions physiologiques normales, la protéine se localise principalement dans l'espace intermembranaire mitochondrial. Lors de stimuli apoptotiques, elle est libérée dans le cytoplasme par des mécanismes impliquant les protéines de la famille Bcl-2 et la perméabilisation de la membrane externe mitochondriale.
• Des modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la phosphorylation, régulent la conformation et la fonction du Cytochrome c, influençant à la fois l'efficacité du transport d'électrons et son activité pro-apoptotique.
• Les mots-clés associés au Cytochrome c sont : structure 3D, apoptose, transport d'électrons, hème, fer, fixation de métal, mitochondrie, phosphoprotéine et chaîne respiratoire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène comprend la protéine Cytochrome c mature de longueur complète (acides aminés 1 à 105), ce qui devrait permettre la reconnaissance de la conformation native chez de multiples espèces en raison de la forte conservation de la séquence.
• Pour le Western blot (WB), envisagez à la fois des conditions réductrices et non réductrices, car la libération de la protéine des mitochondries et la fixation de l'hème peuvent affecter la migration ; validez l'anticorps sur des lysats cellulaires pertinents (par exemple, fractions cytosoliques vs mitochondriales).
• En immunohistochimie (IHC-P), des méthodes de récupération d'antigène (par exemple, récupération épitopique induite par la chaleur) et une dilution optimisée de l'anticorps sont recommandées pour les tissus fixés au formol et inclus à la paraffine, afin de détecter la localisation mitochondriale ou cytosolique du Cytochrome c.
• Pour l'ELISA, l'association de cet anticorps monoclonal avec un deuxième anticorps ciblant un épitope distinct peut permettre une détection par ELISA sandwich ; validez la paire sur des échantillons dopés ou des matrices biologiques pertinentes pour la recherche sur l'apoptose.

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