Anticorps monoclonal de souris anti-CYP7A1 pour WB et ELISA - P22680

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la CYP7A1

• Le cytochrome P450 7A1 (CYP7A1), également appelé cholestérol 7-alpha-monooxygénase ou CYP7, est une enzyme hépatique clé qui initie la voie classique de biosynthèse des acides biliaires.
• Il catalyse la 7-alpha-hydroxylation du cholestérol, étape limitante de la conversion du cholestérol en acides biliaires primaires, régulant ainsi l’homéostasie du cholestérol. Références associées : PMID:12077124, PMID:19965590, PMID:2384150
• Elle hydroxyle également des oxystérols tels que le 4β-hydroxycholestérol et le 24-hydroxycholestérol, contribuant à la synthèse alternative des acides biliaires et au métabolisme des oxystérols. Références associées : PMID:11013305, PMID:12077124
• Elle fonctionne comme une monooxygénase qui utilise l’oxygène moléculaire et le NADPH via la réductase du cytochrome P450 pour incorporer un atome d’oxygène dans le substrat, tout en réduisant le second en eau. Références associées : PMID:11013305, PMID:12077124, PMID:19965590
• Elle oxyde la double liaison 7,8 du 7-déhydrocholestérol et du lathostérol, générant principalement des dérivés 7-céto et élargissant ainsi son rôle dans le métabolisme des stérols. Références associées : PMID:21813643
• Elle est localisée dans la membrane du réticulum endoplasmique et la membrane des microsomes, ce qui correspond à sa fonction de cytochrome P450 lié à la membrane.
• Elle contient un cofacteur fer-hème nécessaire à son activité catalytique et se caractérise par un repliement structural P450 conservé.
• Elle est principalement exprimée dans le foie, comme l’ont révélé des analyses spécifiques des tissus, ce qui concorde avec son rôle dans le catabolisme hépatique du cholestérol.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à une région N-terminale (aa 86-108) qui peut être conservée entre les espèces, ce qui concorde avec la réactivité croisée observée avec la CYP7A1 de souris et de rat.
• Pour le Western blot, une bande spécifique d’environ 58 kDa est attendue. Validez les résultats à l’aide de contrôles positifs et négatifs appropriés, tels que des lysats de foie humain.
• Les applications ELISA peuvent bénéficier de l’utilisation d’une protéine CYP7A1 recombinante comme standard quantitatif ; les conditions du dosage doivent être optimisées de manière empirique.
• La CYP7A1 étant exprimée spécifiquement dans le foie, la préparation des échantillons doit tenir compte de leur origine tissulaire ; les extraits de foie sont recommandés comme contrôle positif.

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