Anticorps polyclonal de lapin anti-CTCF pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - P49711

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la CTCF

• La CTCF (répresseur transcriptionnel CTCF), également désignée sous les noms de protéine à 11 doigts de zinc et de facteur de liaison CCCTC, est un facteur de liaison à la chromatine exprimé de manière ubiquitaire, absent des spermatocytes primaires.
• Elle se lie à des séquences d’ADN spécifiques et régule l’architecture tridimensionnelle de la chromatine en formant des boucles et en ancrant l’ADN à la lamina nucléaire, organisant ainsi le génome.
  Références associées : PMID:16949368, PMID:18347100, PMID:18654629, PMID:19322193
• La CTCF définit les frontières entre l’ADN actif et l’ADN hétérochromatique en se liant aux isolateurs de la chromatine, bloquant ainsi les interactions inappropriées entre les activateurs et les promoteurs.
  Références associées : PMID:18347100, PMID:18654629, PMID:19322193
• Elle joue un rôle essentiel dans l’expression spécifique des allèles au niveau du locus génique soumis à empreinte IGF2/H19, où la liaison à l’allèle maternel établit une conformation de la chromatine qui restreint l’accès de l’activateur à IGF2.
  Références associées : PMID:16107875, PMID:16815976, PMID:17827499
• La CTCF se lie préférentiellement à l’ADN non méthylé, contribuant ainsi au maintien de zones dépourvues de méthylation, tandis que sa liaison est empêchée par la méthylation des CpG.
  Référence associée : PMID:18413740
• Elle agit comme un régulateur transcriptionnel dual, réprimant MYC et BAG1 tout en activant le gène APP.
  Références associées : PMID:8649389, PMID:9591631, PMID:9407128
• La CTCF intervient dans la cohésion des chromatides sœurs et se localise au niveau des centromères pendant la mitose, où elle recrute CENPE dans les régions péricentromériques.
  Références associées : PMID:12191639, PMID:18550811, PMID:26321640
• Elle est considérée comme un suppresseur de tumeur et est essentielle au développement embryonnaire précoce, en régulant la transcription dans les ovocytes et les embryons préimplantatoires.
  Référence associée : PMID:12191639

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène comprend la région N-terminale (acides aminés 1–260) de la CTCF humaine, ce qui peut améliorer l’accessibilité de la protéine native dans les essais d’immunoprécipitation de la chromatine (ChIP).
• Pour le Western blot, une bande prédominante correspondant au poids moléculaire calculé d’environ 83 kDa est attendue ; cependant, des modifications post-traductionnelles peuvent entraîner la présence de bandes supplémentaires. Nous recommandons de valider la taille et la spécificité dans le système d’échantillon concerné.
• Compte tenu de la réactivité croisée rapportée chez l’humain, la souris et le rat, les utilisateurs doivent confirmer les performances de l’anticorps dans leur espèce et leur type de tissu spécifiques, car les niveaux d’expression peuvent varier.
• En immunofluorescence, la CTCF présente une localisation nucléaire avec un enrichissement potentiel au niveau des centromères ; les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour chaque lignée cellulaire.
• Lors de l’utilisation de cet anticorps polyclonal pour l’IP ou l’ELISA, envisagez d’inclure des contrôles isot ypiques appropriés et de tester une gamme de dilutions de l’anticorps en raison de la variabilité entre les lots.

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