Anticorps polyclonal de lapin anti-Complément C3 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P01024

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du Complément C3

• Le Complément C3 est le précurseur de composants non enzymatiques essentiels à toutes les voies du complément (classique, alterne, lectine, GZMK), initiant une cascade qui aboutit à la phagocytose, à la dégradation des pathogènes et à la signalisation immunitaire adaptative. Références associées : PMID:28264884 PMID:31507604 PMID:3653927 PMID:6903192
• Après clivage par la C3 convertase, le C3b est généré ; il se fixe de manière covalente aux surfaces des pathogènes via sa liaison thioester réactive, agissant comme une opsonine, et collabore avec le C4b pour recruter le C2b (voies classique/lectine) ou le CFB (voie alterne) afin d'assembler la C5 convertase. Références associées : PMID:28264884 PMID:31507604 PMID:3653927 PMID:12878586 PMID:18204047 PMID:2387864 PMID:624565 PMID:6554279
• Le fragment C3a agit comme une anaphylatoxine puissante, se liant au C3AR1 pour déclencher une signalisation couplée aux protéines G, conduisant à la phosphorylation et à l'internalisation du récepteur, et stimulant les mastocytes et les basophiles à libérer des cytokines, des chimiokines et de l'histamine, favorisant ainsi l'inflammation locale. Références associées : PMID:6968751 PMID:37169960 PMID:37852260 PMID:8702752 PMID:23383423
• Le C3a sert également de chimioattractant, orientant la migration des macrophages et des neutrophiles vers les tissus inflammés pour faciliter la neutralisation des déclencheurs via la phagocytose et les espèces réactives de l'oxygène. Références associées : PMID:23383423 PMID:342601 PMID:5778786
• Au-delà de ses rôles immunitaires, le C3 agit comme une hormone adipogénique (protéine stimulant l'acylation), se liant au C5AR2 et activant les voies PLC, MAPK et AKT pour stimuler la synthèse des triglycérides et le transport du glucose dans les adipocytes, régulant ainsi le stockage des graisses et la clairance lipidique postprandiale. Références associées : PMID:10432298 PMID:15833747 PMID:16333141 PMID:11773063 PMID:12540846 PMID:19615750
• Le Complément C3 est sécrété dans le plasma et peut également se localiser à la surface cellulaire ; il est abondamment produit par les hépatocytes et les adipocytes, avec des niveaux plasmatiques détectables à la fois à jeun et en état postprandial.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles importantes, notamment la formation de ponts disulfure, la glycosylation, la phosphorylation et la formation d'une liaison thioester critique ; des mutations sont impliquées dans la dégénérescence maculaire liée à l'âge et le syndrome hémolytique et urémique atypique.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (aa 1364-1663) du Complément C3 humain, qui englobe une partie du fragment C3b et le domaine thioester. Cette région est hautement conservée entre les espèces, ce qui est cohérent avec la réactivité croisée observée avec la souris et le rat.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des conditions réductrices et dénaturantes pour bien séparer la protéine de 187 kDa. La présence de multiples ponts disulfure peut entraîner un étalement ou une oligomérisation dans des conditions non réductrices.
• Pour l'immunohistochimie (IHC), optimisez les protocoles de démasquage antigénique et de fixation pour votre type de tissu. Des échantillons de tissu hépatique et de tissu adipeux sont recommandés comme contrôles positifs en raison de la forte expression de C3.
• L'anticorps est également adapté à l'immunofluorescence et à l'ELISA ; les tampons de blocage et d'incubation appropriés doivent être déterminés empiriquement.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il reconnaît plusieurs épitopes sur l'immunogène, ce qui peut potentiellement amplifier le signal dans les applications dénaturantes. Validez les performances dans votre contexte expérimental spécifique.

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