Gasdermine D clivée (C Terminal) mAb de Lapin - Q9D8T2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Gasdermine-D

• La Gasdermine-D (Gsdmd) est le précurseur d'une protéine formant des pores, cruciale pour la pyroptose, une mort cellulaire pro-inflammatoire lytique. Après clivage par les caspases inflammatoires (CASP1, CASP4/CASP11) suite à l'activation de l'inflammasome, le fragment N-terminal s'oligomérise en pores membranaires de 10 à 15 nm de diamètre, permettant la libération d'IL-1β et d'IL-18. Références connexes : PMID:26375003, PMID:26375259, PMID:26611636, PMID:27383986, PMID:29195811, PMID:29274245
• Le pore de la gasdermine-D peut également se former sur les membranes mitochondriales, libérant l'ADN mitochondrial dans le cytosol, et peut tuer directement les bactéries extracellulaires en se liant à la cardiolipine bactérienne et aux phosphoinositides. Références connexes : PMID:27383986, PMID:37001519
• Au-delà de la pyroptose, la gasdermine-D a une fonction de coactivateur de transcription : dans le haut de l'intestin grêle, le clivage par CASP3/CASP7 génère un fragment N-terminal qui transloque dans le noyau, servant de coactivateur pour STAT1 afin d'induire CIITA et le CMH de classe II, maintenant ainsi la tolérance alimentaire. Références connexes : PMID:37327784
• La localisation subcellulaire est dynamique : la gasdermine-D se trouve dans le cytoplasme, les complexes de l'inflammasome, la membrane plasmique, la membrane mitochondriale, le noyau, et est sécrétée à l'extérieur de la cellule après formation des pores.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la palmitoylation, la phosphorylation, l'ubiquitination et la glycosylation ; la protéine contient également des liaisons isopeptidiques et des brins β transmembranaires.
• Spécificité tissulaire : fortement exprimée dans les cellules endothéliales cérébrales de souris, liant la gasdermine-D à l'intégrité de la barrière hémato-encéphalique et aux processus neuro-inflammatoires.
• Clivage induit par les allergènes : l'allergène papaine peut cliver la gasdermine-D pour former des pores N-terminaux qui libèrent spécifiquement l'interleukine-33 (IL-33), favorisant les réponses immunitaires de type 2. Références connexes : PMID:35749514, PMID:35794369

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• En raison de la conception de l'immunogène (résidus C-terminaux 277–376), cet anticorps peut détecter à la fois la gasdermine-D pleine longueur (~53 kDa) et le fragment de clivage C-terminal (~22 kDa) en Western blot. Validez les motifs de clivage en utilisant des macrophages de souris stimulés au LPS/ATP ou des inhibiteurs de la caspase-1/11.
• Pour l'immunoprécipitation, envisagez d'utiliser l'anticorps pour enrichir la gasdermine-D pleine longueur ou son fragment C-terminal ; optimisez les conditions de lyse et de lavage pour préserver les interactions protéiques.
• Dans les applications ELISA, le couplage de cet anticorps avec un anticorps de détection spécifique du N-terminal pourrait permettre de distinguer la gasdermine-D pleine longueur de la forme clivée.

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