Anticorps monoclonal de lapin anti-Citrulline-Histone H3 (Citrullination R8) (Q16695/P68431) pour WB, DB, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3

L'Histone H3 est un composant central du nucléosome, responsable de l'enroulement et de la compaction de l'ADN en chromatine. Ce rôle structurel est essentiel pour réguler l'accessibilité de l'ADN et contrôle ainsi des processus fondamentaux tels que la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication et la stabilité chromosomique. Les histones, y compris H3, sont soumises à un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles – souvent appelées le « code histone » – qui modulent dynamiquement la structure de la chromatine et l'expression des gènes.

Cet anticorps détecte spécifiquement la citrullination sur l'arginine 8 (R8) de l'Histone H3. La citrullination, la conversion de l'arginine en citrulline, est médiée par les peptidylarginine déiminases (PADs) et est impliquée dans la régulation génique, la NETose et les maladies auto-immunes. Il est connu que l'Histone H3 est citrullinée sur plusieurs résidus, dont R3, R8, R17 et R26, et ces modifications peuvent influencer la compaction de la chromatine. Références associées : PMID:16567635.

Les deux numéros d'accès SWISS-PROT couverts par cet anticorps, Q16695 (Histone H3.1t) et P68431 (Histone H3.1), représentent des variants d'histones distincts. Q16695 est un variant H3 spécifique du testicule exprimé dans les cellules testiculaires, tandis que P68431 correspond à l'Histone H3.1 canonique dépendante de la réplication, qui est exprimée de manière ubiquitaire. Les deux se localisent dans le noyau et sur les chromosomes.

L'Histone H3 est largement modifiée sur sa queue N-terminale, notamment par acétylation, méthylation, phosphorylation, citrullination et de nombreuses autres marques. Ces modifications sont régulées dynamiquement et servent de plateformes de liaison pour les complexes modifiant la chromatine, régissant ainsi l'identité cellulaire et la réponse aux signaux environnementaux.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser 10 à 20 µg de lysat cellulaire total par puits. Validez l'anticorps dans le système d'échantillon pertinent (par exemple, cellules stimulées avec citrullination induite) et incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• Pour le dot blot (DB) et l'ELISA, optimisez la concentration d'antigène pour le revêtement et les conditions de tampon pour assurer une détection spécifique de l'Histone H3 citrullinée. Un peptide synthétique citrulliné autour de R8 peut servir de contrôle positif.
• Étant donné que la citrullination peut être transitoire et dépendante d'enzymes, la préparation des échantillons doit préserver les modifications post-traductionnelles ; envisagez d'utiliser des inhibiteurs de PAD ou une lyse immédiate avec des inhibiteurs de phosphatase/protéase appropriés.
• Cet anticorps monoclonal de lapin peut être utilisé pour étudier la dynamique de la citrullination dans divers types d'échantillons humains ; la réactivité croisée avec d'autres espèces est prédite à large spectre, mais les utilisateurs finaux doivent la vérifier dans leurs modèles expérimentaux spécifiques.

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