Anticorps monoclonal de lapin anti-CDK4 pour WB, IHC-P, ELISA - P11802

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la CDK4

• La CDK4 est une kinase sérine/thréonine qui forme des complexes actifs cycline D-CDK4, lesquels phosphorylent les protéines de la famille du rétinoblastome (RB), notamment RB1, régulant ainsi la transition du cycle cellulaire de G1 à S.
• La phosphorylation de RB1 par le complexe cycline D-CDK4 entraîne la dissociation des facteurs de transcription E2F, permettant la transcription des gènes nécessaires à l’entrée en phase S.
• Les complexes cycline D-CDK4 intègrent les signaux mitogènes et antimitogènes afin de contrôler la prolifération cellulaire.
• La CDK4 phosphoryle également SMAD3 de manière dépendante du cycle cellulaire, réprimant ainsi son activité transcriptionnelle.
• La protéine se localise dans le cytoplasme, le noyau et la membrane nucléaire ; la translocation nucléaire est facilitée par le complexe ternaire cycline D/CDK4/CDKN1B.
• La CDK4 subit une acétylation et une phosphorylation, et constitue une kinase de liaison à l’ATP ; l’épissage alternatif génère plusieurs isoformes, et des mutations sont associées à différents cancers.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à la région C-terminale (a.a. 200-303) de la CDK4 humaine, qui est probablement conservée, ce qui étaye la réactivité croisée rapportée avec la souris et le rat.
• Pour le Western blot, s’attendre à une bande proche de 34 kDa ; valider la détection dans des lignées cellulaires en prolifération et utiliser des contrôles de charge appropriés.
• En immunohistochimie, les conditions de récupération antigénique peuvent être optimisées ; une coloration nucléaire et/ou cytoplasmique peut être observée selon le stade du cycle cellulaire.
• Pour les applications ELISA, envisager l’anticorps comme réactif de capture ou de détection ; l’association avec d’autres anticorps anti-CDK4 peut améliorer les performances du test.

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