Anticorps polyclonal de lapin anti-CD146/MCAM pour WB et ELISA - P43121

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD146/MCAM

• CD146, également connu sous les noms de MCAM, MUC18 et MelCAM, est une glycoprotéine de surface cellulaire codée par le gène MCAM chez l’humain.
• Il agit comme une molécule d’adhésion impliquée dans la cohésion de la monocouche endothéliale au niveau des jonctions intercellulaires, jouant un rôle essentiel dans l’intégrité des tissus vasculaires.
• L’expression de CD146 sur les cellules de mélanome facilite l’interaction avec les éléments vasculaires, favorisant la dissémination tumorale hématogène et les métastases.
• Au cours du développement embryonnaire, CD146 peut agir comme une molécule d’adhésion dans les cellules de la crête neurale, favorisant leur migration.
• En tant que récepteur, CD146 déclenche la phosphorylation sur tyrosine des kinases FYN et FAK1 et induit une augmentation transitoire de la concentration intracellulaire de calcium.
• La protéine est localisée dans la membrane et est principalement détectée dans les cellules endothéliales et les cellules musculaires lisses vasculaires des tissus adultes normaux ; son expression accrue est associée à la progression du mélanome malin.
• CD146 contient des domaines extracellulaires de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique, et subit des modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation, la phosphorylation et la formation de ponts disulfure.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 447-646, situés dans la région extracellulaire de CD146 ; cette région est conservée chez l’humain et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot, une bande d’environ 72 kDa est attendue (poids moléculaire prédit d’environ 71,6 kDa), bien que la glycosylation puisse entraîner de légers décalages ; validez la bande à l’aide de contrôles positifs appropriés, tels que des lysats de cellules endothéliales ou de mélanome.
• Pour les applications ELISA, il est possible d’utiliser le dépôt direct de CD146 recombinant ou de lysats cellulaires ; effectuez une titration de l’anticorps et incluez les réactifs de détection secondaires appropriés.
• Comme il s’agit d’un anticorps polyclonal, une variabilité entre les lots est possible ; envisagez d’inclure un contrôle positif connu ou une courbe standard dans chaque expérience afin d’assurer la reproductibilité.

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