Anticorps monoclonal de lapin anti-IgM de souris conjugué à la biotine pour la cytométrie en flux - P01872

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la chaîne lourde mu constante des immunoglobulines (IgM)

• La chaîne lourde mu constante des immunoglobulines (IgM) est la région constante de la chaîne lourde mu, formant les bras de liaison à l'antigène des anticorps IgM. Elle est codée par le gène Ighm dans le locus des chaînes lourdes des immunoglobulines.
• Les IgM sécrétées (sIgM) se multimérisent principalement en pentamères, et parfois en hexamères, permettant une liaison de haute avidité aux antigènes. Les sIgM naturelles (polyréactives) et immunes (spécifiques de l'antigène) sont essentielles pour des réponses humorales efficaces, médiant la reconnaissance et l'élimination des pathogènes via les récepteurs Fc (par exemple, FCMR) et l'activation du complément (voie classique C1q). Références associées : PMID:10899913, PMID:11062505, PMID:28135254, PMID:34788614
• Les IgM liées à la membrane servent de composant récepteur d'antigène du complexe du récepteur des lymphocytes B (BCR), fournissant un signal tonique constitutif pour la survie des lymphocytes B et médiant la signalisation du pré-BCR qui régule le développement des lymphocytes B et l'exclusion allélique.
• L'IgM se trouve à la fois sous forme sécrétée et sur la membrane cellulaire. Les sIgM sont transportées à travers l'épithélium muqueux via PIGR pour l'immunité muqueuse, tandis que les IgM membranaires sont ancrées sur les lymphocytes B.
• Exprimée spécifiquement dans les cellules de la lignée B : précurseurs de lymphocytes B de la moelle osseuse, et cellules B-1 et B-2 matures.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée et les ponts disulfure inter-chaînes essentiels pour la polymérisation et la stabilité structurelle. L'épissage alternatif génère des isoformes sécrétées et liées à la membrane, et la protéine contient des domaines de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps conjugué à la biotine détecte l'IgM de souris en cytométrie en flux. Utilisez un réactif secondaire streptavidine-fluorophore pour l'amplification du signal. Envisagez de titrer à la fois l'anticorps et le conjugué streptavidine pour un indice de marquage optimal.
• L'immunogène correspond aux acides aminés 105-454 de l'IgM de souris (région constante), permettant la reconnaissance des formes sécrétées et liées à la membrane. Pour le marquage de surface des lymphocytes B, utilisez si possible des cellules vivantes non fixées ; la fixation peut altérer l'accessibilité de l'épitope.
• Incluez des contrôles isotypiques appropriés et un blocage des Fc pour minimiser la liaison non spécifique. Aucune réactivité croisée avec d'autres classes d'immunoglobulines de souris n'a été rapportée, mais une validation dans votre système d'échantillons est recommandée.
• Pour le marquage intracellulaire de l'IgM, une perméabilisation est nécessaire ; validez les protocoles de fixation/perméabilisation pour votre type cellulaire spécifique afin de préserver les épitopes.

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